[发明专利]一种鸢尾的组培快繁方法

说明书

技术领域

本发明涉及植物组织培养技术领域，尤其涉及一种路易斯安娜鸢尾的组培方法。

背景技术

路易斯安娜鸢尾系鸢尾科鸢尾属的水生花卉植物，原产美国路易斯安娜州。该植物在北美和欧洲一些国家早已被广泛应用，花期4-5月，花色丰富，不仅具有花大、色艳、叶花并观等优良观赏性状，而且还有较强的适应性，抗寒、耐旱性强、耐管理粗放等特征，同时，在我国长江以南地区更具有常绿等优势特性。目前市场形势看好，但优质苗木供不应求。该系列花卉以往主要以分株、种子进行繁殖，不仅繁殖速度慢，费工费时，满足不了市场的需求；同时，该类植物种子发芽率低，且其种子繁殖后代分离严重，很多品种不能再现原有优良品种的特性，且其分株繁殖又受季节的限制。虽然在现有的组培技术中已有关于路易斯安娜鸢尾组培方法的报导，例如，朱旭东，水生常绿杂种鸢尾组培育苗，中国花卉园艺，2007，10：23-25；路易斯安娜鸢尾组培和苗期生长规律初步研究，福建林业科技，2009，36(3)：175-179)；吴月燕，路易斯安娜鸢尾组织培养过程中愈伤组织诱导和芽的分化，浙江农业科学，2009，1：86-89；贾明良，路易斯安娜鸢尾快繁体系的建立，科技通报，201026(4)：518-522；但上述技术中主要还存在着以下问题：因灭菌技术不当造成污染率较高，导致外植体接种成活率较低——基本上都在60-70％；因激素浓度不当导致芽诱导率较低——70-80％；因此，生产上急需寻找一种能解决以上的技术不足，速度快、繁殖系数高的鸢尾组培快繁的方法，来解决路易斯安娜鸢尾生产实践中种苗供不应求的难题，以加快路易斯安娜鸢尾的推广应用工作。

发明内容

本发明目的是，针对已有鸢尾组培技术所存在的外植体污染率高和芽诱导率低的缺陷，提供一种操作简单、污染率低、植株再生成功率高，种苗品质优的鸢尾组培快繁方法。

一种鸢尾的组培快繁方法，该方法按如下步骤进行：

(1)培养基的配制，包括基本培养基和组培各阶段培养基的组分及其每升所含的重量与体积为：

1)基本培养基：采用LS基本培养基，其中，白糖15-30g/L，琼脂5-8g/L，pH5.6-5.8；

2)芽诱导培养基：LS+山农一号5-10ml/L+6-BA 0.3-1.0mg/L+NAA0.1-0.3mg/L；

3)继代增殖培养基：LS+6-BA 0.5-1.5mg/L+NAA 0.2-0.5mg/L；

4)壮苗培养基：LS+6-BA 0.3-0.5mg/L和NAA 0.5-0.8mg/L；

5)生根培养基：LS+NAA0.5-1.5mg/L+GA0.3-0.5mg/L；

(2)鸢尾脱毒组培苗的培养：

1)外植体的选择与灭菌：取健壮鸢尾植株的幼嫩地下芽，剪除基部以上叶片及根系，用10％洗洁精液浸泡8-10min，流水冲洗1-2h；于超净工作台上用无菌水冲洗，用70％酒精消毒30-60s，0.1％升汞水溶液浸泡8-15min灭菌后用无菌水冲洗5-6次；将其茎尖组织块拨出，切成0.3-0.5cm³的小块作为外植体，备用；

2)芽诱导培养：将茎尖外植体接种到芽诱导培养基上，在25±2℃，光强1500-2500Lx，光照12h/d条件下诱导培养15-20天至形成丛生芽；

3)芽增殖培养：将丛生芽转接到继代增殖培养基上，在25±2℃，光强1500-2500Lx，光照12h/d条件下培养15-25天至形成继代丛生芽；根据对丛生芽数量的需求，每隔10-20天按同样方法进行一次再增殖；

4)壮苗培养：将继代丛生芽转接到壮苗培养基上，在25±2℃，光强1500-2500Lx，光照12h/d条件下培养20-30天至苗高6-8cm；

5)生根培养：将上述壮苗转接到生根培养基中，在25±2℃，光强1500-2500Lx，光照12h/d条件下培养15-30天，至基部长出1-5根根系即成鸢尾脱毒组培苗；

(3)组培苗的炼苗与移栽：

1)炼苗：将长高至10-15cm、长根≥5根的组培苗带瓶移至普通大棚内，放置1-3天后打开瓶盖，在25-28℃，湿度70-80％，光强7000-8000lx条件下炼苗3-5天；