[发明专利]一种蝉棒束孢菌株的分子鉴定方法无效
| 申请号： | 201110178274.6 | 申请日： | 2011-06-28 |
| 公开（公告）号： | CN102851353A | 公开（公告）日： | 2013-01-02 |
| 发明（设计）人： | 鲍晓妮;陈超;魏宁;张健;江三多;孙长胜 | 申请（专利权）人： | 上海泛亚生命科技有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;C12Q1/04 |
| 代理公司： | 上海光华专利事务所 31219 | 代理人： | 许亦琳;余明伟 |
| 地址： | 200433 上海市杨*** | 国省代码： | 上海;31 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 蝉棒束孢 菌株 分子 鉴定 方法 | ||
1.一种蝉棒束孢菌株CGMCC NO.3453的分子鉴定方法，包括下列步骤：
1)提取待测菌株的基因组DNA；
2)采用ITS5和ITS4这对引物对步骤1)提取的基因组DNA作PCR扩增；
ITS5：5’-GGAAGTAAAAGTCCTAACAAGG-3’
ITS4：5’-TCCTCCGCTTATTGATATGC-3’：
3)扩增产物在琼脂糖凝胶上电泳，EB染色，观察DNA扩增结果；
4)对扩增获得的DNA片段进行回收和纯化；
5)将纯化后DNA片段做双向测序；
6)将测得DNA序列与SEQ ID NO：3作比对；
7)若比对结果表明，待测菌株ITS序列与SEQ ID NO：3的内容和排列顺序完全一致，则待测菌株就是蝉棒束孢CGMCC NO.3453菌株。
2.如权利要求1所述蝉棒束孢菌株CGMCC NO.3453的分子鉴定方法，其特征在于，步骤2)所述PCR扩增体系为：每20ul反应体系，内含1×EX PCR缓冲液、1.5mMdNTP、正反向引物各10pmol、EX Tag酶1u和DNA样本200ng及加ddH2O至20μl。
3.如权利要求1所述蝉棒束孢菌株CGMCC NO.3453的分子鉴定方法，其特征在于，步骤2)所述PCR扩增条件为：94℃3分钟为1个循环；而后94℃30秒，55℃30秒，72℃40秒为38个循环；最后72℃7分钟延伸。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于上海泛亚生命科技有限公司，未经上海泛亚生命科技有限公司许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/201110178274.6/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
- 上一篇：一种GPS定位监管的巡航仪
- 下一篇：一步制备亲油性石墨烯的方法
