[发明专利]一种根结线虫生防菌剂及其生产工艺

说明书

技术领域：

本发明属于农业虫害生物防治领域，具体涉及一种根结线虫生防菌剂及其生产工艺。

背景技术：

根结线虫为植物根系专性内寄生动物，是世界性威胁农业生产的主要病原物。据有关研究证实，根结线虫寄主已超过3000种植物，分属114科，包括单子叶植物，双子叶植物，草本植物和禾本科植物。该病害发生会引起严重农作物产量损失，一般造成减产10%～20%，严重的可达75%以上。据不完全统计，线虫危害使世界农业平均每年减产24.5%，所造成农作物经济损失约在1000亿美元。在我国，根结线虫在大部分地区均有发生，侵染作物达百种以上，如水稻、花生、香蕉、柑橘、烟草、甘薯、大豆、棉花、西瓜、马铃薯以及花卉、果树、中药材等，给我国农业生产带来极大损失。在我国该病害致使寄主作物常年减产13～25%，严重时可达70%以上，严重制约了我国蔬菜、果品、花卉等作物的生产和出口创汇，我国农作物每年因根结线虫的危害而遭受的经济损失达数亿元。

    陕西于2000年首次发现根结线虫病害，现已在陕西的陕北、陕南及关中地区的不同作物上发现此病害，侵害作物包括设施蔬菜、水果、药用植物、农作物等。研究表明，在陕西一般棚室当年发生根结线虫病害引起黄瓜减产5％左右，第2年减产10％～15％，第3年减产20％～30％，4年以上减产超过50％，甚至绝收。除直接侵染危害外，根结线虫还和其它病原物造成复合侵染，使作物病害加重，给我省农业生产带来了极大的危害。

农作物根结线虫病害防治目前有多种方法，但大多效果不太理想。采用田间轮作和使用非寄主植物或抗病植物是防治根结线虫的主要管理措施，但其具有一定局限性，如大多数根结线虫种类具有较广的寄主范围，同时，田间病源根结线虫种群大部分是几个种的混合群体，防治效果难以持续。此外，化学杀线虫剂如溴甲烷、必速杀、克线磷、呋喃丹、阿维菌素等曾被广泛地使用，并且获得过一定效果，但易造成土壤环境污染，蔬菜残毒超标等影响品质甚至销售。其他措施如日晒、淹水，使用无病苗木、土壤改良在某些情况下虽能取得一些防治效果，但效果甚微或有较大的局限性。因此，采用以生物防治为核心的无公害可持续治理方法成为控制根结线虫病害主要方向。

发明内容：

本发明要提供一种根结线虫生防菌剂及其生产工艺，以克服现有技术存在防治效果不理想、专一性差、防效时间短和污染大的问题。

为克服现有技术存在的问题，本发明的技术解决方案是：一种根结线虫生防菌剂，由下述重量份数计的原料组成，枝顶孢霉菌菌粉10-15份、沸石20-30份、硅藻土50-60份、几丁质5份和麸皮5-10份；

所述枝顶孢霉菌菌粉的制备过程如下：

（1）液体培养：取国家专业微生物菌种库获得的枝顶孢霉菌，接种于液体发酵培养基中，得到种子液，所说的液体发酵培养基中包含胶体几丁质1.0-2.0份，葡萄糖0-1.0份，磷酸二氢钾1.0份，氯化钙0.2份，氯化钠0.2份，硫酸镁0.5份；

其过程是：液体发酵培养基按照每瓶100ml分装于500ml三角瓶中， 121℃，30min灭菌后，接种枝顶孢霉菌种， 28 ℃±1℃，180rmp振荡幅度培养3天制成生防菌剂的种子液；7L液体发酵培养基置于10L的发酵罐中，得到的种子液按15%体积接种于液体发酵培养基中，搅拌150转/min，控制溶氧0.20-0.28M³/M³·min，液体深层发酵72hr，得种子母液；

（2）固体培养：将上述种子母液按质量比为10%的接种量接入固体培养基中，固体培养基按下述重量配比的原料制得，麦麸500g，硝酸钠0.3~0.6g，磷酸二氢钾0.1g，硫酸镁0.05~0.1g，氯化钠 0.05~0.1g，硫酸铁0.0001~0.0002g，蔗糖2.0-4.0g，加水500g，28 ±1℃固体浅层发酵7~10天，制成固体发酵物；

（3）粉碎：把固体发酵物干燥至水份为15%，将干燥好的培养物用筛孔为149μm的吸尘粉碎机粉碎，并置于孔径为149μm振动筛上分筛，得枝顶孢霉菌菌粉。

上述胶体几丁质通过下述方法制得，将10份细粉几丁质溶于100份浓盐酸中，搅拌均匀，于4℃放置24h，然后取浓盐酸100份研磨均匀，加入500份体积浓度为50%的乙醇搅拌，离心4000r/min，10min,除去上清液，再加入蒸馏水洗涤离心，重复洗涤离心至pH7.0制备获得。