[发明专利]融合蛋白GPR45-Gi1α及其编码基因和应用无效
申请号: | 201110185165.7 | 申请日: | 2011-07-04 |
公开(公告)号: | CN102863535A | 公开(公告)日: | 2013-01-09 |
发明(设计)人: | 刘永学;彭明丽;吴芳明;陈曦;韩春光;白月霞 | 申请(专利权)人: | 中国人民解放军军事医学科学院放射与辐射医学研究所 |
主分类号: | C07K19/00 | 分类号: | C07K19/00;C12N15/62;C12N15/63;C12N5/10;C12N1/15;C12N1/19;C12N1/21;C12N15/866;G01N33/53;G01N33/68 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 融合 蛋白 gpr45 gi1 及其 编码 基因 应用 | ||
1.一种蛋白质,是如下(a)或(b):
(a)由序列表中序列1所示的氨基酸序列组成的蛋白质;
(b)将(a)的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有G蛋白抗原活性的由序列1衍生的蛋白质。
2.编码权利要求1所述蛋白的基因。
3.如权利要求2所述的基因,其特征在于:所述基因是如下1)至4)中任一所述的DNA分子:
1)序列表中序列2自5’末端1至2178位核苷酸所示的DNA分子;
2)序列表中序列2所示的DNA分子;
3)在严格条件下与1)或2)限定的DNA序列杂交且编码具有G蛋白抗原活性的蛋白的DNA分子;
4)与1)或2)限定的DNA序列具有90%以上同源性且编码具有G蛋白抗原活性的蛋白的DNA分子。
4.含有权利要求2或3所述基因的重组表达载体、表达盒、重组细胞或重组菌。
5.如权利要求4所述的重组表达载体,其特征在于:所述重组表达载体为将权利要求2或3所述基因插入pFASTBac1质粒的多克隆位点得到的重组质粒。
6.如权利要求4所述的重组表达载体,其特征在于:所述重组表达载体为将权利要求5所述重组质粒导入大肠杆菌DH10Bac菌株,通过菌内重组得到的含有权利要求2或3所述基因的杆状病毒质粒。
7.一种制备权利要求1所述蛋白的方法,包括如下步骤:
(1)将权利要求6所述杆状病毒质粒转染昆虫细胞,培养后收集上清,即为P1代病毒液;
(2)将所述P1代病毒液感染昆虫细胞,培养后得到权利要求1所述蛋白。
8.如权利要求7所述的方法,其特征在于:所述昆虫细胞为sf9细胞;所述步骤(1)中,所述培养的培养时间为72小时;所述步骤(2)中,所述感染的感染剂量为MOI=5,所述培养的培养时间为72h。
9.一种表达权利要求1所述蛋白的试剂盒,包括大肠杆菌DH10Bac菌株、昆虫细胞和权利要求4或5所述的重组表达载体。
10.权利要求1所述蛋白在药物筛选中的应用。
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