[发明专利]一种从女贞子中制备红景天苷的新方法

说明书

技术领域

本发明属医药技术领域，并涉及在碱转化基础上，从中药材女贞子中分离高纯度红景天苷的方法。 

背景技术

红景天苷，英文名salidroside，化学名“对羟基苯乙醇-β-D-吡喃葡萄糖苷”。分子式为：C₁₄H₂₀O₇，分子量为300.30。 

结构式： 

红景天苷具有抗疲劳、抗衰老、抗氧化、抗炎镇痛的作用；对心血管、中枢神经、肝肾具有保护作用；还有抗肿瘤、防辐射、清除自由基、免疫调节作用等，是一种有广泛应用前景的药物。目前制备红景天苷的主要方法有从红景天属植物红景天中提取分离和化学合成的方法。但红景天属于高原植物，获取困难，价格昂贵；化学合成得率低，副产物多。从木犀科女贞属植物女贞子中制备高纯度红景天苷的方法，少有报道。仅见：发明专利(1)(刘东锋，张翼.一种从女贞子中提取纯化红景天苷的方法[P].中国专利，20101011 17 83.2)、(2)(石任兵，周文娟，田恒康，等.一种从女贞子中制备高纯度红景天苷的方法[P].中国专利，200810098011.2)。而女贞子中红景天苷的含量很低仅为0.02％～0.2％(李曼玲，徐丹，仝会娟，等.红景天苷的含量测定.中国实验方剂学杂志，2010，16(2)：14-16)。迄今，未见涉及通过转化使女贞子中红景天苷含量大幅度提高的基础上，再进行制备高纯度红景天苷的方法。 

发明内容

本发明的目的在于，提供一种基于碱转化从女贞子中制备高纯度红景天苷的方法。 

本发明的技术方案为：以女贞子为原料，经粉碎后，采用一定浓度的乙醇提取，所得提取物经回收溶剂、浓缩至无醇味后，经一定量的水分散离心。离心后上清液，加碱水解后加酸中和，所得上样液，经过HPD-100大孔吸附树脂柱，采用水、一定浓度的乙醇洗脱；洗脱产物经两次硅胶柱层析，甲醇丙酮重结晶或SephadexLH-20、ODS-A等纯化，得高纯度的红景天苷。 

本发明的技术方案通过下述步骤实现： 

步骤1：以女贞子为原料，粉碎后，采用40-80％乙醇回流提取2-4次，提取液减压回收至无醇味，离心，取上清液； 

步骤2：取步骤1中上清液，加入药材重量10-50倍量的无机碱回流水解0.5-4.5小时，水解液加HCl调pH值至中性，得上样液； 

步骤3：取步骤2中上样液，通过大孔吸附树脂吸附结束后，先用水洗脱，水的用量按体积比计算为树脂体积的2-6倍，继而以10％-50％乙醇洗脱，乙醇用量按体积比计算为树脂体积的3-8倍，收集洗脱液，蒸干，真空干燥，得洗脱物； 

步骤4：取步骤3中洗脱物，加50-200体积份甲醇溶解，拌入20-500重量份硅胶，挥尽溶剂，得到拌样硅胶；上样于径高比1∶3-1∶8的硅胶层析柱中，洗脱物重量与硅胶体积比为2-6mg/ml，上样后先以石油醚∶乙酸乙酯1∶1混合溶剂洗脱除去杂质，所用混合溶剂体积为3～5个柱体积，继而采用石油醚∶乙酸乙酯1∶7混合溶剂洗脱，洗脱体积为3～5个柱体积，再用乙酸乙酯洗脱，洗脱体积为1～3个柱体积，最后采用甲醇洗脱，洗脱体积为1个柱体积，分份收集，每30-80ml收集一份，TLC检识，合并含红景天苷部分，减压回收溶剂，得到红景天苷粗品； 

步骤5：取步骤4中红景天苷粗品，加30-100体积份甲醇溶解，拌入20-250重量份空白硅胶拌样，挥尽溶剂，上样于径高比1∶10-1∶30的硅胶层析柱中，红景天苷粗品上样量与硅胶体积比5-15mg/ml，上样后先以石油醚∶乙酸乙酯1∶1混合溶剂洗脱除去杂质，所用混合溶剂体积为2～4个柱体积，继而采用石油醚∶乙酸乙酯1∶7混合溶剂洗脱，洗脱体积为2～4个柱体积，再用乙酸乙酯洗脱，洗脱体积为1～3个柱体积，最后采用甲醇洗脱，洗脱体积为1个柱体积，分份 收集，每20-50ml收集一份，采用TLC检识，合并含红景天苷部分，减压回收溶剂，加溶剂重结晶，或残渣用水溶解，通过Sephadex LH-20或ODS柱色谱纯化，先用水洗脱2～3柱体积，再用10％甲醇洗脱2～3柱体积，收集10％甲醇洗脱物，静置，析出白色针状结晶，得到纯度大于98％的红景天苷。 

所述的碱转化中涉及的碱包括NaOH、NaHCO₃、Na₂CO₃、KOH。优选为NaOH。 

所述的大孔树脂包括D101、HPD-100、AB-8、NKA-9等大孔吸附树脂，优选为HPD-100型大孔树脂。