[发明专利]同时制备niga-ichigoside F1和suavissimoside R1化学对照品的方法

说明书

技术领域

本发明本发明属于医药技术领域，具体涉及一种应用树脂柱分离和高速逆流色谱技术同时制备niga-ichigoside F1和suavissimoside R1化学对照品的方法。

背景技术

茅莓(Rubus parvifolius L.)是蔷薇科悬钩子属植物茅莓的干燥全草，是民间常用草药，具有清热解毒、散瘀止血、祛风利湿、活血凉血、杀虫疗疮等功效，用于妇科止血，疗效显著。现代研究表明，茅莓提取物对脑缺血有保护作用，具有止血和活血化瘀的作用，并且与丹参的药理作用相同。

茅莓主要含有活性成分为皂苷类，其主要为三萜皂苷类化合物。制备niga-ichigoside F1和suavissimoside R1化学对照品对于茅莓药材的开发利用具有重要意义。

目前，尚未见分离制备niga-ichigoside F1和suavissimoside R1化学对照品的相关报道。

发明内容

本发明提供一种工艺简单、易于规模化的制备方法，可以以茅莓提取物为原料，同时制备niga-ichigoside F1和suavissimoside R1两种化学对照品。

为实现上述目的，本发明采用的技术方案如下：

同时制备niga-ichigoside F1和suavissimoside R1化学对照品的方法，其特征在于包括以下步骤：

1）树脂柱粗分离：茅莓药材用水或乙醇水溶液提取得到粗提物，或直接以茅莓提取物为原料，用低浓度乙醇溶液溶解，上大孔树脂柱分离，先用水洗去杂质，再用50%的乙醇溶液洗脱，收集洗脱液，浓缩干燥得到粗品；

2）高速逆流色谱精制：以二氯甲烷-甲醇-水体系为两相溶剂系统，体积比为4-7:5-8:2-5，上相为固定相，下相为流动相，用上相和下相的混合溶液溶解粗品，进行高速逆流色谱分离得到niga-ichigoside F1和suavissimoside R1化学对照品。

所述的大孔树脂可选HPD-100或AB-8型。

所述高速逆流色谱仪转速为700-1000r/min，流动相的流速为1.5-3ml/min。

本发明具有如下优点：

1）本发明采用两步法制备对照品，工艺简单。采用树脂柱粗分离，相较文献中应用较多的萃取方法，对目标成分更有针对性，可实现最大程度的去粗存精，有利于下步精制纯化。

2）本发明采用的技术手段非常适合放大进行规模化生产。

3）本发明同时制备得到两种对照品，纯度高（大于98%），收率高（大于80%），色泽好（白色）。

 

具体实施方式

现结合实施例做进一步详细说明，实施例仅限于说明本发明，而非对本发明的限定。

实施例1

1、树脂柱粗分离：以茅莓提取物为原料，取10g，用15%乙醇溶液溶解，过滤，滤液上HPD-100型大孔树脂柱分离，先用5BV的水洗去杂质，再用4-7BV50%的乙醇溶液洗脱，收集洗脱液，浓缩干燥得到粗品408mg；

2、高速逆流色谱精制：以二氯甲烷-甲醇-水体系为两相溶剂系统，室温下将系统二氯甲烷-甲醇-水（体积比为4:5:2），置于分液漏斗中振摇，放置，平衡一段时间后，取上相作为固定相，下相为流动相，将固定相泵入色谱柱中，使柱中充满，再启动主机转动，转速控制在1000r/min，同时将流动相以3ml/min流速泵入，待流动相从出液端流出、两相达到动态平衡后，用上相和下相的混合溶液溶解粗品，将样品溶液注入色谱系统中，每次进样200mg，紫外检测，收集流出液，减压蒸干得到niga-ichigoside F1对照品32mg和suavissimoside R1对照品35mg。

 

实施例2

1、树脂柱粗分离：以茅莓提取物为原料，取50g，用15%乙醇溶液溶解，过滤，滤液上AB-8型大孔树脂柱分离，先用4BV的水洗去杂质，再用5BV50%的乙醇溶液洗脱，收集洗脱液，浓缩干燥得到粗品2.2g；