[发明专利]一种基于量子点的免疫荧光检测环丙沙星的方法及专用试剂盒有效
申请号: | 201110187929.6 | 申请日: | 2011-07-06 |
公开(公告)号: | CN102253214A | 公开(公告)日: | 2011-11-23 |
发明(设计)人: | 马岚;袁航;吴峰 | 申请(专利权)人: | 清华大学深圳研究生院 |
主分类号: | G01N33/577 | 分类号: | G01N33/577;G01N33/532;G01N33/544;G01N1/38;G01N21/64 |
代理公司: | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人: | 关畅 |
地址: | 518055 广东省深圳*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 基于 量子 免疫 荧光 检测 环丙沙星 方法 专用 试剂盒 | ||
1.一种用于检测环丙沙星的免疫荧光检测试剂盒,包括环丙沙星包被原和量子点标记的环丙沙星抗体。
2.根据权利要求1所述的试剂盒,其特征在于:
所述环丙沙星抗体为抗体效价为106以上、抗体亲和常数为106~108M-1的环丙沙星单克隆抗体;
所述量子点为表面羧基含量为1×10-3~9×10-3mmol/mg的水溶性CdSe/ZnS核壳结构的量子点;所述量子点的量子产率为40~70%。
3.根据权利要求1或2所述的试剂盒,其特征在于:
所述量子点的粒径为10~20nm,其粒径的偏差在10~30%之间;
所述环丙沙星包被原为环丙沙星与载体蛋白的偶联物。
4.根据权利要求1-3中任一所述的试剂盒,其特征在于:所述试剂盒中还包括环丙沙星标准品、稀释液、洗涤液、含有孔的聚苯乙烯板、包被缓冲液和封闭液;
所述环丙沙星标准品为1-环丙基-6-氟-1,4-二氢-4-氧代-7-(1-哌嗪基)-3-喹啉羧酸;
所述稀释液为PBS缓冲液;
所述洗涤液为PBST缓冲液;
所述包被缓冲液为碳酸盐缓冲液;
所述封闭液为含有用于包被的蛋白的PBS缓冲液。
5.根据权利要求1-4中任一所述的试剂盒,其特征在于:所述标准品为如下溶液形式的标准品:用所述稀释液将所述1-环丙基-6-氟-1,4-二氢-4-氧代-7-(1-哌嗪基)-3-喹啉羧酸稀释成如下各个浓度的溶液:0.001、0.005、0.01、0.05、0.1、0.5、1、5、10ug/L。
6.根据权利要求1-5中任一所述的试剂盒,其特征在于:所述环丙沙星包被原包被在所述含有孔的聚苯乙烯板上,包被方法为用所述包被缓冲液稀释所述环丙沙星包被原得到10μg/ml的包被液,每孔中加100μl。
7.根据权利要求1-6中任一所述的试剂盒,其特征在于:所述量子点标记的环丙沙星抗体以如下溶液形式存在于试剂盒中:将每25ug所述量子点标记的环丙沙星抗体用5ml所述稀释液稀释得到的溶液。
8.一种检测样品中环丙沙星的方法,包括如下步骤:用权利要求1-7中任一所述的试剂盒对待测样品进行检测,所述待测样品为动物肌肉组织样本、动物尿样或蜂蜜。
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