[发明专利]检测豇豆胰蛋白酶抑制剂的免疫金颗粒试剂条的制备方法

权利要求书

1.一种检测豇豆胰蛋白酶抑制剂（CpTI）的免疫金颗粒试剂条的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

1）重新优化CpTI基因密码子，构建CpTI基因表达序列；

2）构建CpTI基因和谷胱甘肽-S-转移酶（GST）基因融合表达载体；

3）在细菌表达GST-CpTI融合蛋白后，通过亲合层析柱谷胱甘肽琼脂糖凝胶4B纯化融合蛋白，切除GST, 纯化CpTI蛋白；

4）将GST-CpTI融合蛋白免疫兔，分离纯化得到兔抗CpTI多克隆抗体；

5）将CpTI蛋白免疫雌性Balb/C小鼠，得到稳定分泌单克隆抗体细胞株并进行细胞培养，注射小鼠，获得单克隆抗体；

6）采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金；

7）通过夹心法获得检测CpTI蛋白的免疫金颗粒试剂条。

2.根据权利要求1所述的检测豇豆胰蛋白酶抑制剂（CpTI）的免疫金颗粒试剂条的制备方法，其特征在于，所述步骤2）中的原核表达载体是pGEX-6P-1，构建完成后的融合表达载体是pGEX-6P-1-CpTI。