[发明专利]一种硫酸粘杆菌素预混剂的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及多肽类抗生素预混剂的制备，具体是一种硫酸粘杆菌素预混剂的制备方法。

背景技术

粘杆菌素（colistin）是一种对多重耐药性革兰氏阴性致病菌（如铜绿假单胞菌，Pseudomonas aeruginosa）具有特效抗性的多肽类抗生素，粘杆菌素含有二氨基丁酸，存在游离氨基，因此呈碱性，在临床上常制成盐使用，目前商品化以两种形式存在，硫酸粘杆菌素（colistin sulphate，CS）是其中一种形式。硫酸粘杆菌素可用于猪、禽、牛和羊等动物，由于其抗菌作用强、残留低，不易产生耐药性，中国、美国、欧盟和日本等许多国家批准作为饲料添加剂或兽药。可治疗多种病菌引起的动物饲养疾病，并能促进动物生长和提高饲料的利用率。

目前从发酵液中分离硫酸粘杆菌素主要有：离子交换法、泡沫分离法。采用离子交换法，此方法分离步骤长、能耗高，而且带来大量废水，严重污染环境。2006年7月12日公开的申请号为200510122187.3的发明公开了一种泡沫分离法制备多粘菌素E的方法，起泡用到溶剂，给环境带来污染，且成本较高。

发明内容

本发明的目的是针对现有技术存在的问题，经过申请人长期的研究和实验，发明了一种制备硫酸粘杆菌素预混剂的新工艺，它不仅提高了硫酸粘杆菌素预混剂的收率，而且更加绿色环保。本发明采用先过滤除去发酵液中的菌体，再浓缩滤液，然后沉淀分离，最后流化床造粒，得到硫酸粘杆菌素预混剂，具有专一性强、工序短、设备投资少、收率高、成本低，而且整个过程不采用溶剂，减少环境污染等优点。

本发明的目的是通过以下技术方案得以实现的： 

一种硫酸粘杆菌素预混剂的制备方法，其特征在于，它依次包括如下步骤：

（1）发酵液的预处理：将含有粘杆菌素的发酵液用酸调pH为2.0~3.5，边搅拌边加入2~5%wt的助滤剂后过滤；

（2）减压浓缩：将滤液在-0.095~-0.098Mpa下浓缩，温度为50~90℃，浓缩后得到液相含量为25000~35000ug/ml的浓缩液；

（3）沉淀分离：将浓缩液用碱调pH为10.0~12.0，搅拌0.5~4 h，在0~10℃条件下静止2~4 h，真空抽滤，得到滤饼，边搅拌滤饼边加入稀硫酸至pH为3.0~7.0，得到酸化液；

（4）流化床造粒：按酸化液与载体的重量比为60~80%的比例将酸化液输入装有载体的流化床造粒机中，进风温度为140~200℃，出风温度为70~120℃，酸化液输完后，造粒0.5~3 h，得到硫酸粘杆菌素预混剂。

具体来说，本发明先除去菌体，再进行分离纯化；浓缩滤液的目的在于提高滤液的浓度，粘杆菌素的含量会随滤液浓度的提高而提高，这样会提高粘杆菌素沉淀分离时的收率，对于生产硫酸粘杆菌素预混剂降低成本具有重要意义；沉淀分离是在一定的条件下将粘杆菌素以某种形式沉淀出来，杂质溶解在溶质中，过滤后得到固体，再将固体用硫酸酸化溶解，得到高纯度的硫酸粘杆菌素溶液，起到分离纯化的效果，专一性强，重要的是不像离子交换法产生大量的废水，也不用到任何溶剂，不污染环境，成本低。

作为优选，步骤（1）所述的酸为草酸、硫酸、盐酸、磷酸的一种或多种。

作为优选，步骤（1）所述的助滤剂为珍珠岩、硅藻土、纤维素、酸性白土、活性炭、石棉的一种或多种。

作为优选，步骤（2）所述温度为60~70℃。

作为优选，步骤（3）所述碱为氢氧化钠、氨水、氢氧化钾、碳酸钠、碳酸氢钠的一种或多种。

作为优选，步骤（3）所述用碱调pH为10.5~11.5。

作为优选，步骤（3）所述用稀硫酸调pH为6.0~7.0。

作为优选，步骤（4）所述的载体为稻壳粉、玉米芯粉、米糠粉、麦麸、苜蓿粉、碳酸钙的一种或多种。

作为优选，步骤（4）所述的进风温度为170~180℃。

作为优选，步骤（4）所述的出风温度为90~100℃。

本发明的主要优点是与现有技术相比，专一性强、工序短、成本低、废水少、污染少，而且收率高，达80~90%。

具体实施方式

以下实施例中所述粘杆菌素发酵液，由多粘芽孢杆菌产生的含有粘杆菌素的发酵液。

实施例1

（1） 发酵液的预处理

将发酵液用硫酸调pH值为3.0，边搅拌边加入3.5%wt的硅藻土助滤剂，通过板框过滤，至无滤液滴出为止，得到板框过滤液。板框过滤收率为96.5%。

（2） 减压浓缩