[发明专利]羊胎及羊胎盘生物制品的质量控制检测方法

说明书

技术领域

本发明涉及羊胎及羊胎盘生物制品的质量控制检测方法。

背景技术

我国利用动物的各种器官、组织及代谢产物进行治病、防病和医疗保健的历史悠久，现存完整的药学典籍— — 《神农本草论》就有牛黄、犀角、鹿茸、阿胶等多种动物药物的记载。说明了我国在制药技术上早已利用动物药物进行加工、提取、精制而成较为纯净的药剂。

胎盘(Placenta)又名“紫河车”，为常用中药，现代医学研究表明：胎盘含有多种免疫球蛋白、活性肽等生物活性物质及氨基酸、矿物质等成分(统称活细胞素)，是一种机体免疫功能的调节剂和营养、美容保健品。科学家对多种动物胎盘进行对比实验后发现，羊胎盘的细胞组织结构与人胎盘最为相似，可望成为同人类胎盘具有同等养生价值的替代物。

现有市场上羊胎及羊胎盘生物制品较多，目前还未有一套有效控制羊胎及羊胎盘生物制品的质量的方法。

发明内容

为了解决上述的技术问题，本发明的目的是提供一种羊胎及羊胎盘生物制品的质量控制检测方法，该方法快速，简便，重现性和稳定性均很好，能够作为羊胎及羊胎盘生物制品鉴别的依据，并为羊胎及羊胎盘生物制品及其制剂的质量控制提供依据。

为了实现上述的目的，本发明采用了以下的技术方案：

羊胎及羊胎盘生物制品的质量控制检测方法，该方法包括以下的步骤：

1）取羊胚胎及羊胎盘原液、精制粉或者精制羊胎素，加入适量纯水加热或超声溶解，放冷，定容，过滤，取续滤液作为供试品溶液；

2）采用凝胶渗透色谱-蒸发光散射法测定羊胎及羊胎盘生物制品的分子量分布，制定标准图谱；

①液相条件：流动相为纯水，流速1ml/min，柱温30℃；

②固定相：凝胶过滤色谱柱色谱柱Shodex OHpak SB-806 HQ，Shodex OHpak SB-805 HQ，Shodex OHpak SB-804 HQ，Shodex OHpak SB-803 HQ串联；

③检测器：蒸发光散射检测器，蒸发温度：100℃，雾化温度：80℃，氮气流速：1.5L/min；

3）对被检测产品采用上述凝胶渗透色谱-蒸发光散射法制定分子量分布图谱与标准图谱比较判定被检测产品的质量。

本发明由于采用了上述的技术方案，该方法快速，简便，重现性和稳定性均很好，能够作为羊胎及羊胎盘生物制品鉴别的依据，并为羊胎及羊胎盘生物制品及其制剂的质量控制提供依据。

附图说明

图1为本发明的一种羊胚胎及羊胎盘精制粉GPC-ELSD的标准色谱图。

具体实施方式

一种羊胚胎及羊胎盘精制粉的制备方法，该方法包括以下的步骤：

1）羊胚胎及羊胎盘原料前处理：以２-３个月龄的羊胚胎及羊胎盘为原料，清洗、去除杂质，0-5℃低温下粉碎成粗粉。

2）羊胚胎及羊胎盘超微粉碎、细胞破壁：将羊胚胎及羊胎盘粗粉低温冷冻（-40℃～-45℃）2h后低温（-20℃）超微粉碎（WZJ100药用超微粉碎机），细胞破壁，达到0.1-10μm粒度。

3）羊胚胎及羊胎盘的提取和酶解：经超微粉碎、细胞破壁后的羊胚胎及羊胎盘浆液加6倍蒸馏水温浸提取后过滤得滤液A和沉淀A，沉淀A用木瓜蛋白酶与胰蛋白酶酶解后抽滤得水解液B，酶解温度45℃，酶配比1g：1g，pH7．5，酶与底物为20mg：3g；合并滤液A和水解液B，得羊胚胎及羊胎盘素原液。

4）羊胚胎及羊胎盘素原液经减压浓缩至相对密度1.05～1.10，喷雾干燥得羊胚胎及羊胎盘精制粉，进风温度110℃-125℃，出风温度45℃-60℃。

采用凝胶渗透色谱-蒸发光散射(GPC-ELSD)法测定羊胎及羊胎盘生物制品的分子量分布，制定其质量标准。

步骤如下：

①取羊胚胎及羊胎盘精制粉，加入适量纯水加热或超声溶解，放冷，定容，过滤，取续滤液作为供试品溶液。

②液相条件：流动相为纯水，流速1ml/min，柱温30℃。

③固定相：凝胶过滤色谱柱（GPC）色谱柱Shodex OHpak SB-806 HQ，Shodex OHpak SB-805 HQ，Shodex OHpak SB-804 HQ， Shodex OHpak SB-803 HQ串联。

④检测器：蒸发光散射检测器（ELSD），蒸发温度：100℃，雾化温度：80℃，氮气流速：1.5L/min。

羊胚胎及羊胎盘精制粉GPC-ELSD标准色谱图如图1所示，根据上述的方法对被检测产品制定分子量分布图谱与标准图谱比较判定被检测产品的质量。