[发明专利]microRNA 302在早期胚胎发育中的应用

说明书

技术领域

本发明涉及畜牧学(动物繁殖)，尤其涉及一种microRNA 302在早期胚胎发育中的应用。 

背景技术

在哺乳动物胚胎发育过程约有30％～70％的胚胎夭折，绝大部分在胚胎发育的早期。特别是在体外培养时，早期胚胎凋亡指数更高。近年来，由于早期胚胎作为细胞形态发生和分化模型的重要性有所增加，以及发育生物学技术的日新月异，早期胚胎阶段日益受到重视，研究早期胚胎基因表达及调控，具有重要的理论和实践意义。 

microRNA是一类内生的、长度约20-24个核苷酸的小RNA，miRNA基因通常是在核内由RNA聚合酶II(polII)转录的，最初产物为大的具有帽子结构(7MGpppG)和多聚腺苷酸尾巴(AAAAA)的pre-miRNA。pre-miRNA在核酸酶Drosha和其辅助因子Pasha的作用下被处理成70个核苷酸组成的pre-miRNA。RAN-GTP和exportin 5将pre-miRNA输送到细胞质中。随后，另一个核酸酶Dicer将其剪切产生约为22个核苷酸长度的miRNA:miRNA*双链。这种双链很快被引导进入沉默复合体(RISC)复合体中，其中一条成熟的单链miRNA保留在这一复合体中。成熟的miRNA结合到与其互补的mRNA的位点通过碱基配对调控基因表达。 

而miRNA是近年来才发现的一类小分子RNA，它们构成了多细胞生物中一类更为丰富的基因调控分子，影响许多编码蛋白的基因的表达，与细胞的生长和分化，胚胎的发育，肿瘤的形成和抑制都有密切的关系。 

发明内容

本发明的一个目的是提供物质在制备具有抑制胚胎发育功能的产品中的应用。 

本发明提供了如下1)-3)中任一所述物质在制备具有抑制胚胎发育功能的产品中的应用： 

1)microRNA 302； 

2)含有microRNA 302的编码基因的重组载体； 

3)含有microRNA 302的编码基因的重组病毒。 

所述microRNA 302的核苷酸序列为序列表中的序列1； 

所述microRNA 302的编码基因的核苷酸序列为序列表中的序列2自5’末端第251-273位。 

所述抑制胚胎发育为滞后早期胚胎发育， 

所述早期胚胎发育为从受精卵发育开始至囊胚形成。 

所述胚胎为小鼠胚胎；所述产品为药物。 

所述含有microRNA 302的编码基因的重组载体为将microRNA 302的编码基因插入pmR-mCherry载体得到表达microRNA 302的重组载体，具体为将microRNA 302的编码基因插入pmR-mCherry载体的BglII和HindIII酶切位点间得到的含有microRNA 302的编码基因的重组载体。 

本发明的另一个目的是提供一种重组载体。 

本发明提供的重组载体，为将microRNA 302的编码基因插入pmR-mCherry载体的BglII和HindIII酶切位点间得到的载体。 

所述的重组载体在制备用于筛选促进胚胎发育功能药物的模型中的应用也是本发明保护的范围。 

本发明的另一个目的是提供一种抑制胚胎发育功能的产品。 

本发明提供的产品，其活性成分为如下1)-3)中任一一种： 

1)microRNA 302； 

2)含有microRNA 302的编码基因的重组载体； 

3)含有microRNA 302的编码基因的重组病毒。 

所述microRNA 302的核苷酸序列为序列表中的序列1； 

所述microRNA 302的编码基因的核苷酸序列为序列表中的序列2自5’末端第251-273位。 

所述抑制胚胎发育为滞后早期胚胎发育； 

所述早期胚胎发育为从受精卵发育开始至囊胚形成。 

所述产品为药物。 

所述胚胎为小鼠胚胎。 

本发明的实验证明，本发明初步阐明早期胚胎发育的生理机制，在原核期胚胎中显微注射microRNA 302超表达载体片段，可以观察到microRNA 302使早期胚胎发育滞后。本发明的优点为新颖、准确。 

附图说明