[发明专利]用生物玻璃促使蛋白质结晶的方法

权利要求书

1.一种用生物玻璃促使蛋白质结晶的方法，其特征在于：先将生物玻璃颗粒与增加生物玻璃表面活性的液体混合均匀，再进行超声振荡而获得生物玻璃悬浊液，然后用滴管将生物玻璃悬浊液转移至蛋白质结晶环境，从而生物玻璃悬浊液促进蛋白质结晶；

所述生物玻璃颗粒的粒度100nm～200nm，平均孔径90nm～200nm，悬浊液中生物玻璃颗粒的浓度为1～100个/μL。

2.根据权利要求1所述的用生物玻璃促使蛋白质结晶的方法，其特征在于：生物玻璃悬浊液中生物玻璃颗粒的浓度为2～50个/μL。

3.根据权利要求1所述的用生物玻璃促使蛋白质结晶的方法，其特征在于：所述增加生物玻璃表面活性的液体为混合溶液，其中溶剂为去离子水，溶质包括浓度为15～25mg/mL的氯仿、1～3mg/mL的致孔剂聚乙二醇及3～8mg/mL活性剂硫酸化油。

4.根据权利要求1所述的用生物玻璃促使蛋白质结晶的方法，其特征在于：所述增加生物玻璃表面活性的液体为去离子水。

5.根据权利要求1所述的用生物玻璃促使蛋白质结晶的方法，其特征在于：所述蛋白质结晶环境为在微流体蛋白质结晶板中的结晶环境；

所述微流体蛋白质结晶板为注塑一体件，包括支撑结构部（1）以及在支撑结构部（1）上以阵列形式分布的结晶单元（2），每一个结晶单元（2）由两端的储液孔部（21）和连通两端储液孔部（21）的上下连接槽（23、22）组成，所述储液孔部（21）的内腔截面积从上向下逐渐减小，连接槽部的上连接槽（23）上大下小；

蛋白质结晶时，将蛋白质过饱和溶液滴入结晶板的结晶单元（2）的其中一个储液孔部（21）的储液孔中，然后向结晶单元（2）的另一个储液孔部（21）的储液孔中滴入沉淀剂溶液和生物玻璃悬浊液，从而生物玻璃悬浊液进入结晶环境，也即2个储液孔部（21）中的物质通过下连接槽（22）使得蛋白质过饱和溶液与生物玻璃悬浊液相互扩散，且下连接槽（22）的槽口部位以及储液孔的下端口处设有用于密封的阻挡物；最后在两边溶液的界面处生物玻璃悬浊液促进蛋白质结晶。

6.根据权利要求1所述的用生物玻璃使蛋白质结晶的方法，其特征在于：生物玻璃悬浮液中的生物玻璃由溶胶凝胶法制得。

7.根据权利要求6所述的用生物玻璃使蛋白质结晶的方法，其特征在于：由溶胶凝胶法制备生物玻璃的步骤如下：先按照换算成氧化物摩尔比为 P₂O₅:CaO:MgO:SiO₂=1:（3～3.5）:（1～1.2）:（4.5～5.5）的比例，分别称取对应量的P₂O₅ 、Ca(NO₃)₂、Mg(NO3)₂、正硅酸乙酯，然后使各化合物分别与无水乙醇混合并加热回流而溶解在乙醇中，分别制得均匀的P₂O₅的乙醇溶液、Ca(NO₃)₂的乙醇溶液、Mg(NO3)₂的乙醇溶液及正硅酸乙酯的乙醇溶液，乙醇与各物质的摩尔比分别为（4～10）:1；

向正硅酸乙酯的乙醇溶液中加入去离子水，使正硅酸乙酯预水解40～50分钟；

将P₂O₅的乙醇溶液、Ca(NO₃)₂的乙醇溶液、Mg(NO3)₂的乙醇溶液依次滴加至上述正硅酸乙酯的乙醇溶液中，滴加时，前一种乙醇溶液滴加完毕1～1.5小时候再滴加后一种乙醇溶液，滴加完毕后加热并剧烈搅拌而得到待溶胶化的混合液；

向上述混合液中加入去离子水，用硝酸调节溶液pH=2～2.5，而使得溶液溶胶化，制得的溶胶经过陈化、凝胶化制得湿凝胶；将湿凝胶与尿素混合均匀后放在500℃～550℃的炉中点火，燃烧结束后，淬火得到软团聚粉末，在玛瑙研钵中充分研磨，而得到超细生物玻璃颗粒，颗粒粒度小于200nm。