[发明专利]后期补加前体物利用短密青霉高效累积生产霉酚酸的方法有效
申请号: | 201110202202.0 | 申请日: | 2011-07-19 |
公开(公告)号: | CN102321697A | 公开(公告)日: | 2012-01-18 |
发明(设计)人: | 孙爱友;魏东芝;董玉国;王丽华;徐瑞;张舰 | 申请(专利权)人: | 华东理工大学 |
主分类号: | C12P17/04 | 分类号: | C12P17/04;C12R1/80 |
代理公司: | 上海科盛知识产权代理有限公司 31225 | 代理人: | 林君如 |
地址: | 200237 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 后期 补加前体物 利用 青霉 高效 累积 生产 霉酚酸 方法 | ||
1.后期补加前体物利用短密青霉高效累积生产霉酚酸的方法,其特征在于,该方法包括以下步骤:
将短密青霉(Penicillium brevicompactum)在PDA斜面基上培养10天,用30wt%甘油洗脱成为孢子悬浊液,按2wt%含量将孢子悬浊液接种到种子培养基上,控制温度为28℃,活化培养72h,然后将活化后的短密青霉接种在发酵罐中,采用优化后的葡萄糖-甘氨酸液体培养基进行发酵培养,控制温度为28℃,发酵得到霉酚酸。
2.根据权利要求1所述的后期补加前体物利用短密青霉高效累积生产霉酚酸的方法,其特征在于,所述的种子培养基为以下组分及含量:蛋白胨2.0g/L、酵母粉1.0g/L、淀粉1.0g/L、葡萄糖(C6H12O6·H2O)10.0g/L,溶剂为蒸馏水,pH值为6.5。
3.根据权利要求1所述的后期补加前体物利用短密青霉高效累积生产霉酚酸的方法,其特征在于,所述的优化后的葡萄糖-甘氨酸液体培养基为以下组分及含量:葡萄糖(C6H12O6·H2O)80~120g/L、甘氨酸12~15g/L、磷酸二氢钾2~4g/L、硫酸镁(MgSO4·7H2O)0.5~1g/L、甲硫氨酸0.5~1g/L,溶剂为蒸馏水,pH值为4.4~4.8。
4.根据权利要求1所述的后期补加前体物利用短密青霉高效累积生产霉酚酸的方法,其特征在于,所述的发酵培养分为发酵初期和发酵中后期两个阶段,发酵初期为120小时,期间自然发酵不补加任何的培养基,发酵中后期需要向发酵罐中补加甲硫氨酸补料培养基。
5.根据权利要求4所述的后期补加前体物利用短密青霉高效累积生产霉酚酸的方法,其特征在于,所述的甲硫氨酸补料培养基中甲硫氨酸浓度为12.5g/L,补加的速率为0.5~2.0g/L·天,补加时间为24小时。
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