[发明专利]一种同时用于大花蕙兰茎尖丛生芽诱导和增殖的培养基及其使用方法

说明书

技术领域

    本发明涉及一种植物培养基，属于大花蕙兰组织培养技术，特别是一种同时用于大花蕙兰茎尖丛生芽诱导和增殖的培养基及其使用方法。

背景技术

大花蕙兰(Cymbidium glandiflorium)，是兰科兰属( Cymbdiium)中的一部分大花附生种类及其杂交种。其花色艳丽、姿态优美、花期长，是目前我国花卉市场上流行的室内盆栽花卉之一。大花蕙兰与大多数兰花一样，种子的胚发育不完全，几乎没有胚乳，种子的自然萌发率极低，在自然状态下繁衍困难，传统上靠分株繁殖，分株能力弱、增殖率极低、繁殖速度慢。由于长期无性繁殖，带病毒的植株日益增多，品质下降，造成我国目前市售种苗主要依靠国外进口。采用组培技术生产高品质的试管苗是满足种苗市场的一个有效途径。

在大花蕙兰快繁的现有技术中，对大花蕙兰的离体培养主要通过诱导茎尖分生组织形成原球茎或愈伤组织再分化获得试管苗，此方法虽然诱导效率高，但畸形苗率高，不利于产业化大规模生产。公开号为CN1586166（大花蕙兰优质种苗快速繁殖方法）、CN101455178（一种新品种大花蕙兰的培养方法）和CN1247022（大花蕙兰离体快速繁殖方法）三种发明专利都是采用原球茎方法进行大花蕙兰组织快繁。虽然刘丽锋等（丛生芽——大花蕙兰快速繁殖的新途径[J];四川农业大学学报，2004（2））报导的方法通过一个茎尖分生组织诱导形成丛生芽，但多数茎尖分化一个芽，诱导效率低，茎尖在培养80天后增殖率就不再发生变化。采用大花蕙兰茎尖或种子为外植体常规繁殖中，在诱导、继代、育苗和生根四个阶段使用不同的培养基，生产流程多，生产成本高。

发明内容

本发明的目的，在于针对现有技术的不足，提供一种能提高丛生芽诱导率并且同时可以用于增殖的培养基，通过该培养基和生根培养基即可实现常规需四种培养基四个阶段的培养效果，生产的种苗品质好，简化生产程序，提高效率，节约了成本。

本发明的这样实现的，所述一种同时用于大花蕙兰茎尖丛生芽诱导和增殖的培养基，其特征是：该培养基的组分用量为，

基本培养基中大量元素含量减半，1L；

6-苄基嘌呤，2mg/L；

萘乙酸，0.3mg/L；

蔗糖，20mg/L；

琼脂，8g/L；

Ph5.8。

本发明所述一种同时用于大花蕙兰茎尖丛生芽诱导和增殖的培养基的使用方法，其特征是：

1）在解剖镜下剥取大花蕙兰茎尖，包括茎尖分生组织，还包括叶原基部分，可以大到带有一片心叶，接种在上述诱导和增殖培养基上，诱导出丛生芽；

2）将诱导的丛生芽接种在上述诱导和增殖培养基上继续增殖扩繁；

3）将诱导的丛生芽小芽切下，接种在生根培养基（1/2MS+NAA 0.3mg/L）上生根；

4）将生根小苗炼苗后移栽。

本发明组培苗诱导及培养条件包括温度、光照，上述步骤1至4培养温度为24±2℃，光照1400lx；步骤3所用丛生芽小芽，其生长2cm以上的芽即可用于生根培养诱导。

上述组分中，基本培养基中大量元素含量减半，提供植物组织生长发育所需的无机营养元素和部分有机营养元素，6－苄基嘌呤和萘乙酸是植物生长调节剂，具有促进培养组织形成丛生芽的作用，蔗糖提供组织生长所用的碳素营养，琼脂的主要作用是固化培养基，起支撑作用。将上述组分搅拌溶解均匀，pH调整为5.8左右即可。

本发明的有益效果是，采用本发明进行大花蕙兰快繁，对剥取大花蕙兰茎尖的大小要求较低，剥取的不只是茎尖分生组织，还包括叶原基部份，可以大到带有一片心叶，降低了操作难度；采用本培养基对大花蕙兰茎尖进行丛生芽的诱导和增殖，可以在将大于2cm左右的小苗进行生根诱导的同时，对其他较小的芽继续在该培养基上进一步增殖培养；使用本培养基一个大花蕙兰茎尖在80天最多可以诱导出20个以上丛生芽，诱导效率高，而且还可以在该培养基上继续增殖；本试验利用丛生芽途径，从启动培养到生根培养，不需要经过原球茎阶段，只用了两种培养基就实现了四个阶段的培养，简化了生产程序，节约成本，提高了效率，降低了由于经过原球茎诱导分化导致的变异率，保障种苗品质。

具体实施方式

本发明所述一种用于大花蕙兰茎尖丛生芽诱导及增殖培养基及其使用方法，该培养基是将6－苄基嘌呤6－BA、萘乙酸NAA、蔗糖和琼脂溶解于将基本培养基MS中大量元素含量减半的培养基中而成（称1/2MS），其组分的用量为：