[发明专利]大豆食用油及其深加工产品中转基因成份检测试剂盒及其检测方法

说明书

技术领域：

本发明涉及转基因大豆及其深加工产品，具体而言是一种大豆食用油及其深加工产品中转基因成份检测试剂盒及其检测方法。

背景技术：

转基因作物自面世及大规模推广种植以来，就以其自身的优势为人类社会创造了巨大的经济效益。但转基因作物及其加工产品的生物安全性隐患也是一个不可忽视的事实。面对着这把双刃剑，世界上许多国家纷纷出台了相应地法律法规来对转基因作物及其加工产品进行标识管理及安全性评价。

1983年人类成功培育了世界上第一种转基因植物——含抗生素药类抗体的烟草。但直到1994年，具有延熟保鲜功能的转基因番茄才成为首例批准进行商业化生产的转基因植物。此后，转基因作物正式走进了大众的视线，在全球得到了大面积推广。1996年全球仅有6个国家种植转基因作物，而到2008年数量激增至25个国家；与此同时，1996年全球转基因作物种植面积仅有170万公顷，而到2008年则累计达到8亿公顷（Clive James，2008）。

到目前为止，已经有超过100种以上的转基因植物被商业化种植，其中最广泛的是大豆、玉米、棉花和油菜。2008年全球大豆种植面积约为95，000，000公顷，其中转基因大豆占70%份额（Clive James，2008）。

美国孟山都公司生产的抗草甘膦除草剂转基因大豆（Roundyup Ready Soybean），简称RR大豆，是世界上最早获准进行商业化种植的转基因大豆品种，(1994年5月首次获准在美国进行商业化种植)。它是应用转基因技术将外源EPEPS基因导入大豆并正确表达，进而育成的具有抗草甘膦除草剂特性的转基因大豆品种（AGBIOS，2002；Monsanto，2002） 。

大豆类食品制品及相关产品一直以来为都是为人民群众所热爱的，可以预见，随着我国经济的进一步发展，人民群众生活水平的提高，大豆类食品制品及相关产品的需求量必然上升；而国内的大豆产值与市场需求间一直有着一定的差距。自1996年开始，中国成为大豆、豆粕、粮油的全面净进口国，现已是世界上最大的大豆进口国。2008年中国大豆总产量为1656万吨，而进口量已达到惊人的3743 万吨。（罗维燕，2009）。有证据表明，2008年，美国、阿根廷、巴西转基因大豆的种植率分别高达91.9%、90.4%和70.3%,而来自美国、巴西、阿根廷的大豆约占我国总进口大豆份额的90%。(梁克红等，2009)。

而转基因作物自面世以来，就其安全性各界一直存在着较大的争议。故此，我国出台了相应地法律法规要求进行相应地转基因标识。本发明为转基因大豆及其深加工产品中转基因成份地检出提供了可行性高且可靠的方法。同时也为自由市场上售卖地大豆类食品制品、超市中添加大豆成份的深加工产品中转基因成份地检测检出提供了有力地技术支撑。

发明内容

   发明目的

   本发明提供一种大豆食用油及其深加工产品中转基因成份检测试剂盒及其检测方法

   技术方案

一：按下列试剂制备转基因成份检测试剂盒：

（1）：A液

PCR反应缓冲液：内含10×PCR Buffer（Mg²⁺）、dNTPs (10 mM each)、ddH₂O。

（2）：B液

      Taq DNA聚合酶（5 U/μL）

（3）：C液

      溶液I（20 pmol/μL）：Lectin：5′- GCCCTCTACTCCACCCCCATCC -3′

5′- GCCCATCTGCAAGCCTTTTTTGTG-3′

（4）：D液

      溶液                                                （20 pmol/μL）：CaMV35S启动子：5′- GCTCCTACAAATGCCATCA -3′

                           5′- GATAGTGGGATTGTGCGTCA -3′

（5）：E液

溶液（20 pmol/μL）：NOS终止子：5′- GAATCCTGTTGCCGGTCTTG -3′

5′- TTATCCTAGTTGCGCGCA -3′

（6）：F液