[发明专利]一种检测降钙素原的试剂盒

说明书

技术领域

本发明涉及降钙素原的检测技术，特别是涉及一种检测降钙素原的试剂盒。

背景技术

近些年来，对全身性感染的病理、生理过程有了更多了解，支持强化治疗也获得显著改善，但在非心脏重症监护病房中患者的首位死因仍然是全身性感染及其并发症。美国每年大约有500000例全身性感染患者，约40％最终死亡。因此，需要一种标记物能更有效地反映感染导致的炎症损伤程度。降钙素原(procalcitonin，PCT)是具有高灵敏度、特异性的新指标，它在细菌或真菌感染合并严重全身系统反应或器官低灌注时显著升高，而在病毒或局灶感染时水平正常或轻度升高。这个特性使得PCT用来鉴别系统感染和非感染性炎症或局灶感染。 

降钙素原（Procalcitonin,PCT）是人降钙素的前体物。降钙素原来自定位于第11号染色体上(11p15，4)的单拷贝基因，该基因由2800个碱基对组成，含6个外显子和5个内含子，基因全长M_r约7600。转录后在甲状腺滤泡旁细胞粗面内质网内翻译成降钙素原前体proprocalcitonin，由116个氨基酸残基组成，包括N端84个氨基酸、活性降钙素(CT，32肽)和降钙蛋白(katacalcin，21肽)三部分，PCT的相对分子量为13KD。在正常情况下，具有激素活性的降钙素是在甲状腺滤泡旁细胞产生与分泌，并由细胞内特殊蛋白酶分解PCT成降钙素。

正常健康人体内PCT水平很低(<0.05ng/mL)。血清PCT浓度≤0.5ng/mL出现重症败血症和／或败血症休克的风险较低；血清PCT浓度≥2ng/mL出现重症败血症和／或败血症休克的风险较高。在细菌感染(特别是脓毒血症、革兰阴性杆菌)引起的全身炎症反应时血清PCT水平常显著增高，其增高程度与感染严重程度和死亡率呈正相关。在全身细菌感染患者血清PCT浓度升高比C反应蛋白（CRP）及其它炎性因子出现早，在感染2h出现升高，6h急剧上升，8～24h维持高水平，且对全身与局部细菌性感染的鉴别具有特殊价值。PCT在血中半衰期为22～29h，检测不受临床用药影响；是疗效观察和预后观察的重要指标。非细菌感染时血清PCT浓度不升高，因而可以鉴别二者。在脓毒血症的辅助和鉴别诊断方面，与其它炎症指标相比，PCT被认为是目前最敏感和最特异的脓毒血症诊断指标。随着细菌耐药性、重症感染患者的增加，在快速诊断显得愈发重要。近年来发现，在全身严重细菌感染、败血症及多种器官功能失调综合征的辅助诊断方面，降钙素原(PCT)是一个具高灵敏度、高特异性的新指标，不仅能早期鉴别细菌与非细菌感染，更是败血症的预警和诊断指标，且PCT与细菌感染的程度成正相关，因此越来越受到临床重视。

目前，PCT在临床中的应用主要有以下方面。

1）自身免疫性疾病   与其他标记物如血沉、C反应蛋白不同，炎症性疾病(如红斑狼疮、结缔组织病、反应性关节炎和炎症性肠病)活动期间PCT值无显著性变化。Tamaki等检测99例系统性自身免疫病患者，细菌感染组的PCT水平显著高于免疫病活动组(两组的PCT值分别为：4.539±9.677和0.116±0.127，P<0.001)，PCT诊断细菌感染的准确性是0.797，敏感性53.3% ，特异性97.1％ 。PCT不受自身免疫病活动影响，仅在全身感染时显著升高，因此PCT可用来鉴别自身免疫病活动与是否同时合并感染，且它不受使用激素剂量和其他免疫抑制因素的影响。

2）器官移植的监测

Hammer等对78例心脏或肺脏移植患者研究显示，急性排异期C反应蛋白和白细胞记数升高，而PCT无变化。合并全身细菌或真菌感染时PCT＞1ng/mL，因此PCT可用来鉴别急性排异反应与感染。病毒或局灶感染时PCT正常或轻微升高，PCT＜1ng/mL。肝脏移植后的急性排异反应并未影响术后的PCT值。肾脏移植后存在排异反应的患者与对照组间PCT值差异亦无显著性。PCT浓度不受免疫抑制剂如硫唑嘌呤、环孢菌素和他克罗姆的影响，口服激素以及急性排异期大剂量激素冲击治疗对PCT水平无影响。但使用鼠单克隆CD3单抗抗肾移植排异反应时PCT浓度升高，类似细胞因子释放。CD3单克隆抗体引起大量肿瘤坏死因子-a释放，肿瘤坏死因子-a促进PCT mRNA表达。CD3单克隆抗体治疗后PCT升高不提示合并感染。PCT为器官移植术后鉴别急性排异反应与细菌、真菌及病毒感染提供了方法。

3）脓毒症