[发明专利]尿样中血清素及代谢产物检测的薄层检测池及制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及的是一种电化学检测技术领域的装置及其制备方法，具体是一种用于尿样中血清素及代谢产物检测的薄层检测池及制备方法。

背景技术

血清素即5-羟色胺，存在于肥大细胞、血小板和肠粘膜的嗜银细胞中。研究表明阑尾发生炎症导致肥大细胞、嗜碱细胞脱颗粒，释放组胺、5-羟色胺等炎症介质，血液中血清素的浓度增加。血清素在单胺氧化酶的作用下在体内迅速代谢生成5-羟吲哚乙酸，从尿液中排除。因此尿样中5-羟色胺及其代谢产物5-羟吲哚乙酸含量的测定对阑尾炎的诊断有一定参考价值。

目前已经有多种检测技术用于5-羟色胺和5-羟吲哚乙酸的测定，如光度法，荧光法，化学发光法，极谱法，伏安法和毛细管电泳等。虽然上述方法已经用于生物和药物样品中5-羟色胺和5-羟吲哚乙酸的检测，但是很多方法存在着预处理复杂、成本高、灵敏度低以及不能在同一生物样品上同时测定这些化合物的缺点而影响了这些方法的应用。

发明内容

本发明针对现有技术存在的上述不足，提供一种用于尿样中血清素及其代谢产物检测的薄层检测池及其制备方法，通过简单步骤实现对尿样中血清素及其代谢产物浓度的检测。

本发明提供一种尿样中血清素及代谢产物检测的薄层检测池，包括：工作电极、参比电极和辅助电极，其中：工作电极、参比电极、辅助电极的输入端与液相色谱的输出端相连接，工作电极、参比电极、辅助电极的输出端与电化学系统的输入端相连接，电化学系统的输出端与计算机信号采集端相连接，其特征在于，所述的工作电极包括：贵金属粒子层、聚溴酚蓝层和电极基体，其中：贵金属粒子沉积在聚溴酚蓝膜上，聚溴酚蓝沉积在电极基体上。所述的工作电极中贵金属粒子层的厚度为40～200纳米，聚溴酚蓝膜的厚度为30～500纳米。

所述的电极基体为玻碳材质的电极基体。

所述的液相色谱采用Luna 5μm C₁₈反相色谱柱。

本发明提供一种尿样中血清素及代谢产物检测的薄层检测池的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

第一步：聚溴酚蓝修饰电极的制备：首先将玻碳电极进行抛光处理后在二次蒸馏水中超声清洗；然后清洗后的玻碳电极放入磷酸盐溶液中进行循环扫描处理；再将循环扫描后的玻碳电极放入溶质为溴酚蓝的磷酸盐溶液中，再次进行循环扫描处理；将经过二次循环扫描处理后的玻碳电极取出后用二次蒸馏水清洗，制得聚溴酚蓝修饰电极；

第二步：贵金属粒子加载：首先将聚溴酚蓝修饰电极置于含可溶行贵金属盐溶液中，进行循环扫描处理后取出经过扫描的聚溴酚蓝修饰电极，用无水乙醇和二次蒸馏水依次轮流冲洗若干次，得到贵金属粒子加载后的聚溴酚蓝修饰电极作为工作电极；

第三步：依次将参比电极、工作电极和辅助电极与液相色谱及电化学系统相连，其中：参比电极为Ag/AgCl电极；辅助电极为不锈钢制成的电极，制成用于尿样中血清素及其代谢产物检测的薄层检测池。

在第一步中所述的循环扫描处理是指将工作电极、参比电极和辅助电极分别与电化学系统相连，以一定的扫描速率在设定的电压范围中进行循环电位扫描。

第一步中所述的磷酸盐溶液中溴酚蓝的浓度为1.0×10^-5mol/L～0.5mol/L。

第一步中所述的磷酸盐缓冲溶液是指：磷酸根浓度为0.2mol/L的磷酸二氢钾和磷酸氢二钠溶液。

第三步中所述的液相色谱使用的流动相为含有5％～50％甲醇和0.2mol/L的pH5.0～7.0的磷酸盐缓冲溶液，该流动相的流速为1.0mL/min。

本发明通过以下步骤进行检测：

首先打开液相色谱及电化学系统，使得不同已知浓度的5-羟色胺和5-羟吲哚乙酸样本随磷酸盐缓冲溶液经Luna 5μm C₁₈反相色谱柱，依次流过参比电极、工作电极和辅助电极的表面；

然后利用CHI832型电化学系统记录下不同样本产生的电流信号，根据不同样本下的已知5-羟色胺和5-羟吲哚乙酸浓度及对应实测的响应电流的电流值作为纵横坐标进行拟合，对薄层检测池进行样本学习；

再将处理过的尿样20μL置于制备好测试环境中，测得响应电流的电流值，根据经过样本学习得到的5-羟色胺和5-羟吲哚乙酸浓度—相应电流的线性关系图读出该电流值对应的尿样中所含的5-羟色胺和5-羟吲哚乙酸浓度。