[发明专利]一种从三叶海棠叶中提取白杨素的方法

说明书

技术领域

本发明属于生物技术领域，尤其是涉及一种从三叶海棠叶中提取白杨素的方法。

背景技术

白杨素又叫5，7-二羟基黄酮、柯菌，分子式C₁₅H₁₀O₄，分子量254.24，分子结构为：

白杨素溶于碱液溶液，室温下溶于丙酮，微溶于乙醚、乙醇和氯仿，不溶于水。白杨素具有抗癌、抗氧化、抗高血压、抗菌、消炎等作用，特别是肿瘤治疗和预防作用备受人们关注。

三叶海棠又名山里红，为蔷薇科植物。三叶海棠叶中富含黄酮类物质、氨基酸和微量元素等，幼叶可以昆虫，制成三叶虫茶。大龄叶和枯叶一般是废弃物，只能作为肥料。

现有白杨素提取方法多是从木蝴蝶中提取，经过醇提、萃取、层析、结晶得到。但是木蝴蝶中含量较低，生产成本较高。而三叶海棠叶中白杨素苷含量较高，含量高达5%，是制备白杨素的好原料。但是从三叶海棠叶中提取白杨素的方法公开较少，如“HPLC法测定三叶海棠叶中白杨素苷含量”，该文献采取丙酮超声提取，干样上聚酰胺柱乙醇梯度洗脱，浓缩结晶，丙酮重结晶得到白杨素苷，再在6%硫酸溶液中水解得到白杨素。此法采用丙酮提取，溶剂沸点低，对操作人员和环境危害严重，干样上柱，制备量小，只适合实验室生产。

发明内容

本发明的目的是提供一种从三叶海棠叶中提取白杨素的方法，该方法开辟了一种新的白杨素生产途径，原料资源丰富，可以提高产品产量，降低生产成本，易于工业化生产。

本发明的目的是通过以下技术方案来实现的：

一种从三叶海棠叶中提取白杨素的方法，其特征在于：取三叶海棠叶粉碎，加7-10倍量水溶液回流提取2-3次，提取液过滤加入大孔树脂柱吸附，水洗树脂柱无糖色，取4-6倍量50-70%乙醇溶液洗脱，洗脱液减压浓缩，浓缩液加酸水解2-4小时，离心，离心物水洗中性，用1-2倍量70%乙醇溶液回流洗涤1-2次，再用95%乙醇回流溶解结晶1-2次，干燥即得白杨素产品。

所述的大孔树脂型号可选AB-8、HZ818、LSA-40或HPD400A中的一种。

所述酸水解条件为：酸可选盐酸或硫酸，溶液的酸浓度为1-2mol/L，水解温度65-80℃。

本发明的优点是：采用三叶海棠叶生产白杨素，开辟了生产白杨素的新的途径，解决了原料含量低生产成本高的难题，而且三叶海棠叶原料资源丰富，是一种变废为宝的途径，还可以解决枯叶冬季易燃烧造成森林火灾；工艺采用大孔树脂纯化再水解，简化了后续工艺纯化步骤，操作简单，适合工业化生产，还可以减少酸的用量，减少了污染。

下面将结合具体实施方式进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。

具体实施方式

实施例1：

三叶海棠叶粉碎，取1kg，加10倍量水溶液回流提取2次，提取液冷却常温，过滤，加入1LAB-8大孔树脂柱吸附，饱和吸附后，水洗树脂柱无糖色，再取6L50%乙醇溶液洗脱，收集洗脱液减压浓缩，浓缩液加盐酸至酸浓度2mol/L，80℃水解2小时，离心，得离心物35g，离心物水洗中性，用1倍量70%乙醇溶液回流洗涤2次，粗品用95%乙醇回流溶解，至完全溶解后放置结晶，滤出结晶物干燥得淡黄色白杨素22g，经高效液相检测含量98.1%。

实施例2：

三叶海棠叶粉碎，取1kg，加7倍量水溶液回流提取3次，提取液冷却常温，过滤，加入1L HZ818大孔树脂柱吸附，饱和吸附后，水洗树脂柱无糖色，再取4L70%乙醇溶液洗脱，收集洗脱液减压浓缩，浓缩液加硫酸至酸浓度1mol/L，65℃水解4小时，离心，得离心物41g，离心物水洗中性，用2倍量70%乙醇溶液回流洗涤1次，再用95%乙醇回流溶解，至完全溶解后放置结晶，结晶2次，干燥得淡黄色白杨素24g，经高效液相检测含量98.5%。

实施例3：

三叶海棠叶粉碎，取1kg，加8倍量水溶液回流提取2次，提取液冷却常温，过滤，加入1L LSA-40大孔树脂柱吸附，饱和吸附后，水洗树脂柱无糖色，再取5L60%乙醇溶液洗脱，收集洗脱液减压浓缩，浓缩液加硫酸至酸浓度1.5mol/L，75℃水解3小时，离心，得离心物38g，离心物水洗中性，用2倍量70%乙醇溶液回流洗涤1次，再用95%乙醇回流溶解，至完全溶解后放置结晶，结晶2次，干燥得淡黄色白杨素21g，经高效液相检测含量98.4%。

实施例4：