[发明专利]一种嗜吞噬细胞无形体抗原及含有该抗原的试剂盒

说明书

技术领域

本发明属于人粒细胞无形体病检测技术领域，具体涉及一种嗜吞噬细胞无形体抗原及含有该抗原的试剂盒。

背景技术

人粒细胞无形体病(Human granulocytic anaplasmosis，HGA)是由嗜吞噬细胞无形体(Anaplasma phagocytophilum)侵染人末梢血中性粒细胞引起，以发热伴白细胞、血小板减少和多脏器功能损害甚至死亡为主要临床表现的新发疾病。人粒细胞无形体病是硬蜱叮咬人体而引起的人兽共患性疾病。1994年美国报告首例人粒细胞无形体病病例(Chen SM，Dumler JS，Bakken JS，et al.Identification of a granulocytotropic Ehrlichia species as the etiologic agent of human disease.J Clin Microbiol，1994，32(3)：589-595.)。2006年我国在安徽省发现首例人粒细胞无形体病病例，此后通过回顾性血清学与分子生物学调查发现我国浙江、山东、河南及湖北等省份均存在HGA病例(Zhang L，Liu Y，Ni D，，et al.Nosocomial transmission of human granulocytic anaplasmosis in China.JAMA，2008，300(19)：2263-2270.Zhang S，Hai R，Li W，et al.Seroprevalence of human granulocytotropic anaplasmosis in central and southeastern China.Am J Trop Med Hyg，2009，81(2)：293-295.Zhang L，Shan A，Mathew B，et al.Rickettsial Seroepidemiology among farm workers，Tianjin，People′s Republic of China.Emerg Infect Dis，2008，14(6)：938-940.Chahan B，Jian Z，Xuan X，，et al.Serological evidence of infection of Anaplasma and Ehrlichia in domestic animals in Xinjiang Uygur Autonomous Region area，China.Vet Parasitol，2005，134(3-4)：273-278.)。由于该病为新发疾病，相关的研究稍显薄弱，一旦疾病爆发可能由于技术储备不足而导致诊断不明，贻误治疗甚至引起恐慌。

目前实验室检测主要有包括血清及病原学检测：(1)急性期血清间接免疫荧光抗体(IFA)检测嗜吞噬细胞无形体IgM抗体阳性。(2)急性期血清IFA检测嗜吞噬细胞无形体IgG抗体阳性。(3)恢复期血清IFA检测嗜吞噬细胞无形体IgG抗体滴度较急性期有4倍及以上升高。(4)全血或血细胞标本PCR检测嗜吞噬细胞无形体特异性核酸阳性，且序列分析证实与嗜吞噬细胞无形体的同源性达99％以上。(5)分离到病原体。

由于人粒细胞无形体病无特异性临床表现，早期诊断较困难。病原学检测包括PCR检测嗜吞噬细胞无形体特异性核酸阳性以及分离病原体。其中PCR检测不适宜基层医院使用，其检测的阳性率也偏低；病原体的分离更需一定的设备和技术储备，不易成功。目前我国血清学检测使用的免疫荧光试剂主要依赖美国进口，价格非常昂贵，而且制备荧光片需大量培养嗜吞噬细胞无形体，荧光片的制备很难标准化和产业化，因此利用免疫荧光方法进行大规模的样品检测受到限制，再者，由于荧光片制备采用感染的全细胞易产生交叉反应性，影响检测的特异性。

由于人粒细胞无形体病是硬蜱叮咬人体而引起的，因此开展蜱传播疾病的鉴别诊断显得尤为重要。嗜吞噬细胞无形体的早期诊断对控制其传播具有重要意义，而特异性抗原则是实验室诊断优劣的关键所在。目前开展嗜吞噬细胞无形体的研究力量严重不足，尚缺乏高灵敏度、高特异性的血清检测试剂。