[发明专利]一种新型耐高温β-葡萄糖苷酶及其编码基因和应用

权利要求书

1.一种分离的多肽，其特征在于，该多肽选自下组：

(a)如SEQ ID NO：2所示的多肽；

(b)将SEQ ID NO：2所示的氨基酸序列经过一个或多个氨基酸残基的取代、缺失或添加而形成的，且具有(a)多肽功能的由(a)衍生的多肽；

(c)具有(a)多肽功能的SEQ ID NO：2的蛋白片段；

(d)在SEQ ID NO：2的N或C末端具有标签序列，或在其N末端具有信号肽序列的多肽。

2.一种分离的多核苷酸，其特征在于，它包含一核苷酸序列，该核苷酸序列选自下组：

(1)编码如权利要求1所述多肽的多核苷酸；

(2)与多核苷酸(1)互补的多核苷酸。

3.如权利要求2所述的多核苷酸，其特征在于，该多核苷酸编码如SEQ ID NO：2所示氨基酸序列的多肽。

4.如权利要求2所述的多核苷酸，其特征在于，该多核苷酸的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示。

5.一种载体，其特征在于，它含有权利要求2-4任一所述的多核苷酸。

6.一种遗传工程化的宿主细胞，其特征在于，它含有权利要求5所述的载体，或其基因组中整合有权利要求2-4任一所述的多核苷酸。

7.一种权利要求1所述的多肽的制备方法，其特征在于，该方法包含：

(a)培养权利要求6所述的宿主细胞；

(b)从培养物中分离出权利要求1所述的多肽。

8.权利要求1所述的多肽的用途，用于水解糖苷键。

9.一种组合物，其特征在于，它含有权利要求1所述的多肽以及食品学或工业上可接受的载体。

10.如权利要求9的组合物，其特征在于，还含有调节酶活性的添加物。

11.如权利要求10的组合物，其特征在于，所述的调节酶活性的添加物是提高酶活性的添加物；所述添加物选自巯基乙醇；或

所述的调节酶活性的添加物是抑制酶活性的添加物：Ca²⁺、Co²⁺、Mn²⁺、Ba²⁺、Al³⁺、Ni²⁺、Zn²⁺和Fe²⁺、Cu²⁺、Fe³⁺；或在添加至底物后可水解形成Ca²⁺、Co²⁺、Mn²⁺、Ba²⁺、Al³⁺、Ni²⁺、Zn²⁺和Fe²⁺、Cu²⁺、Fe³⁺的物质。

12.一种形成葡萄糖的方法，其特征在于，该方法包含：用权利要求1所述的多肽处理待水解的底物，所述的底物选自：对硝基苯-β-D-葡萄糖苷、对硝基苯纤维二糖苷、水杨苷、纤维二糖和它们的混合物。

13.如权利要求12所述的方法，其特征在于，在pH3.5-12条件下，用权利要求1所述的多肽处理待水解的底物。

14.如权利要求12所述的方法，其特征在于，在温度10-105℃条件下，用权利要求1所述的多肽处理待水解的底物。

15.如权利要求12所述的方法，其特征在于，用权利要求1所述的多肽处理的同时，还加入调节酶活性的添加物。

16.权利要求1所述多肽的用途，其特征在于，所述用途包括：

(1)水解纤维素、芳基葡萄糖苷、烷基葡萄糖苷、β-1，3-葡萄糖苷；

(2)催化人参皂苷Rg3水解为人参皂苷Rh2；

(3)水解β-糖苷型异黄酮为苷元型异黄酮；

(4)将白藜芦醇苷转化为白藜芦醇；

(5)水解乳糖的β-糖苷键；和

(6)用作风味酶。