[发明专利]植物开花相关基因LFY/FLO同源片段的快速克隆方法及其专用引物无效

专利信息
申请号: 201110217275.7 申请日: 2011-08-01
公开(公告)号: CN102268429A 公开(公告)日: 2011-12-07
发明(设计)人: 鄢波;于丽霞;汤晓倩;姚有林;樊国盛 申请(专利权)人: 西南林业大学
主分类号: C12N15/11 分类号: C12N15/11;C12N15/29;C12N15/10
代理公司: 昆明合众智信知识产权事务所 53113 代理人: 康珉
地址: 65020*** 国省代码: 云南;53
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摘要:
搜索关键词: 植物 开花 相关 基因 lfy flo 同源 片段 快速 克隆 方法 及其 专用 引物
【权利要求书】:

1.一对植物开花相关基因LFY/FLO同源片段快速克隆的专用引物,所述的专用引物是简并引物LYF和LYR,所述的LYF的核苷酸序列是5′- TAYATIAAYAARCCIAARATG -3′,所述的LYR的核苷酸序列是5′-ARIYKIGTIGGIACRTACCA-3′。

2.一种植物开花相关基因LFY/FLO同源片段的快速克隆方法,包括提取植物样品的基因组DNA,用专用引物进行PCR扩增,扩增产物的回收、克隆和测序,其特征在于:所述的专用引物是简并引物LYF和LYR,所述的引物LYF的核苷酸序列是5′- TAYATIAAYAARCCIAARATG -3′,所述的引物LYR的核苷酸序列是5′-ARIYKIGTIGGIACRTACCA-3′;所述的PCR扩增的PCR反应体系是:在一个25μl反应体系里,10×Buffer 2.5μl,dNTP Mixture 2μl,25μM LYF 1μl;25μM LYR 1μl,样品DNA 1μl ,5U/μl Taq 酶0.5μl,ddH2O 17μl; PCR反应条件是:94℃预变性2min;94℃变性30s,44℃退火30s,72℃延伸30s,共35个循环; 72℃延伸10min;预期扩增片段大小为236bp。

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