[发明专利]一种超声-微波协同提取硫酸软骨素的方法

权利要求书

1.一种超声-微波协同提取硫酸软骨素的方法，其特征在于，包括以下操作步骤：

步骤1，

将鱼的下脚料依次经过蒸煮、清洗、烘干、粉碎、脱脂、过筛后得到鱼骨粉末；

步骤2，

在鱼骨粉末中加入体积百分浓度为1～3%的NaOH溶液，鱼骨粉末与NaOH溶液的质量比为1：40～70；将鱼骨粉末和NaOH溶液的混合物放置在超声波-微波协同提取仪中进行提取，设置其参数为：超声波30～50w，微波60～300w，提取时间90～270s；提取完成后，将提取物于50～70℃水浴锅中浸提20～40min，过滤，回收的滤液为提取液；

步骤3，

待提取液自然冷却至室温后，调节提取液的pH值至5～7；然后向提取液中加入复合蛋白酶，其添加量为提取液质量的2%，于40～60℃下恒温酶解2～4h，酶解结束后，灭酶，灭酶时间为5～10min；

步骤4，

待灭酶后的提取液自然冷却至室温后，加入粉末活性炭于50～60℃水浴锅中进行脱色20～30min，粉末活性炭的用量是灭酶后提取液质量的2%；对脱色后的提取液进行离心分离，将离心后所得上清液进行超滤处理，使其体积浓缩至原体积的1/2～1/3，得到浓缩液；

步骤5，

将浓缩液的pH值调节至5～7，再加入体积百分浓度为95%的乙醇，使最终的乙醇浓度控制在60～70%；然后静置至沉淀完全后，离心，将离心后所得的醇沉物用丙酮及石油醚脱水脱脂后干燥，即得到硫酸软骨素。

2.根据权利要求1所述提取硫酸软骨素的方法，其特征在于：所述步骤1中，将鱼的下脚料于70～80℃水浴锅中蒸煮15～20min，清洗后，在50～60℃下烘干，经粉碎后，用丙酮进行脱脂，过50～60目筛，得到鱼骨粉末。

3.根据权利要求2所述提取硫酸软骨素的方法，其特征在于：所述步骤1中，用丙酮对下脚料粉末进行脱脂的具体方法为：通过向下脚料粉末中加入4～5倍量的丙酮，充分搅拌后静置15～30min。

4.根据权利要求1所述提取硫酸软骨素的方法，其特征在于，所述步骤5中将离心后所得的醇沉物用丙酮及石油醚脱水脱脂，其具体方法为：首先向醇沉物中加入2～3倍量的丙酮，待醇沉物与丙酮充分反应后，离心，离心机的转速为4000～5000 rpm ，离心时间为10～20min；随后取出沉淀物并加入2～3倍量的石油醚，待两者充分反应后离心，离心机的转速为4000～5000 rpm ，离心时间为10～20min。