[发明专利]一种从槲寄生中制备高圣草素的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种从槲寄生中制备高圣草素的方法，尤其是涉及一种利用酶解法制备高圣草素的方法。

背景技术

槲寄生又叫北寄生、冬青、桑寄生、柳寄生、黄寄生、冻青、寄生子，通常寄生于麻栎属、苹果属、白杨属、松属各树木。现代研究表明槲寄生含有大量黄酮、生物碱、萜类化合物，具有对心血管系统的作用、抗血小板凝聚作用及抗肿瘤作用。

槲寄生中的黄酮大多以高圣草素为母核的黄酮苷，如高圣草素-7-O-β-D-葡萄糖苷、高圣草素-7-O-β-D-葡萄糖苷-4-O-β-D-芹菜糖苷。

高圣草素(homoeriodictyol)又叫高圣草酚，为二氢黄酮化合物，熔点：223-224℃，分子式：C₁₆H₁₄O₆，分子量：302，分子式：

高圣草素较易溶于乙醇及醋酸，几乎不溶于水及醋酸乙酯，不溶于苯及氯仿。有利尿作用。

现有从槲寄生制备高圣草素的方法，没有专属性工艺。而文献“槲寄生化学成分的研究I”公开的方法为研究型方法，不适合高圣草素的制备。由于高圣草素在槲寄生中苷形式存在，传统工艺一般用酸水解，但是酸水解对环境污染严重，不宜采用。

发明内容

本发明的目的是克服现有方法的缺陷，提供一种从槲寄生中制备高圣草素的方法，该方法利用酶解法生产，既降低了污染有提高了产品收率。

本发明的目的是通过以下技术方案来实现的：

一种从槲寄生中制备高圣草素的方法：

1)槲寄生药材粉碎，加60-80％乙醇溶液微波或超声提取2-3次，提取液浓缩无醇调节ph4-6，加入生物酶酶解8-10小时，酶解液加入大孔树脂柱中吸附，用3-6倍量60-80％乙醇溶液洗脱，收集洗脱液减压浓缩结晶，滤出，得粗提物；

2)把上述粗提物甲醇溶解加聚酰胺拌样干燥，加入聚酰胺树脂柱，甲醇溶液梯度洗脱，薄层检测，收集高浓度洗脱液浓缩至小体积放置结晶，再用乙醇溶液重结晶2-3次，干燥得高圣草素。

步骤1)中的生物酶可选纤维素酶、果胶酶和淀粉酶中的一种或任意组合，总用量为原料量的3-5‰。

步骤1)中的大孔树脂型号可选HZ816、AB-8或HPD-100中的一种。

步骤2)中的甲醇溶液梯度洗脱为：先用4-5BV30-40％甲醇洗脱，再取50-60％甲醇溶液洗脱目标成分。

本发明的优势在于方法采用酶解法制备高圣草素，解决传统工艺酸水解的污染严重、反应条件苛刻的技术难题。

本发明的优势之二是采用大孔树脂和聚酰胺树脂结合纯化，方法操作简单，可以实现工业化制备。

下面将结合具体实施方式进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施例。

具体实施方式

实施例1：

槲寄生药材粉碎，取1kg，加6倍量80％乙醇溶液微波提取2次，每次1h，合并提取液浓缩无醇盐酸调节ph5，加入3g纤维酶搅拌均匀，40-50℃酶解10小时，酶解液加入HZ816大孔树脂柱中吸附，用3倍量80％乙醇溶液洗脱，收集洗脱液减压浓缩结晶，滤出，得到粗提物13g。甲醇溶解粗提物加30g聚酰胺拌样干燥，加入聚酰胺树脂柱，先用4BV30％甲醇洗脱，再取50％甲醇溶液洗脱，薄层检测，收集高浓度洗脱液浓缩至1/3放置结晶，滤出结晶物再用90％乙醇溶液重结晶2次，干燥得高圣草素7.3g，经HPLC检测含量96.5％。

实施例2：

槲寄生药材粉碎，取1kg，加5倍量60％乙醇溶液超声提取3次，每次0.5h，合并提取液浓缩无醇盐酸调节ph4.5，加入2g纤维酶和1g淀粉酶搅拌均匀，40-50℃酶解8小时，酶解液加入AB-8大孔树脂柱中吸附，用6倍量60％乙醇溶液洗脱，收集洗脱液减压浓缩结晶，滤出，得到粗提物10g。甲醇溶解粗提物加20g聚酰胺拌样干燥，加入聚酰胺树脂柱，先用3BV40％甲醇洗脱，再取60％甲醇溶液洗脱，薄层检测，收集高浓度洗脱液浓缩至1/4放置结晶，滤出结晶物再用95％乙醇溶液重结晶2次，干燥得高圣草素6.6g，经HPLC检测含量97.3％。

实施例3：