[发明专利]一种鸡胚活性成分的制备方法

权利要求书

1.一种鸡胚活性成分的制备方法，包括精选受精卵、孵化和植物血凝素尿囊腔接种，其特征是：包括下列具体步骤：

a.精选鸡受精卵，表面常规去污，常规孵化7～9天，然后将植物血凝素接种于尿囊腔中，继续孵化1～3天，孵化后去除蛋壳、胚体和蛋黄，将剩余物质放入冰柜中，在≤-20℃的温度条件下，冰冻1～10小时，然后对鸡胚成分进行粉碎；

b.将粉碎后的鸡胚成分进行打浆，打浆时在鸡胚中加入4～6倍鸡胚成分体积预冷至0～4℃的无菌生理盐水，在50～80转/分的搅拌速度下搅拌6～10分钟；

c.将打成浆的鸡胚成分进行4～6次反复冻融，冰冻温度为-20～-30℃，每次冰冻时间为1～4小时，室温条件下融化；

d.将反复冻融的鸡胚成分经20目绢布过滤，过滤后再加入4～6倍体积预冷的生理盐水经3μm过滤器再次进行过滤，获得的滤液即为鸡胚胎素溶液；

e.在相对湿度小于30％的环境中，将所得到的鸡胚胎素置于密闭容器中进行避光保存，以备用。

2.根据权利要求书1所述的鸡胚胎素制备方法，其特征是：所述常规孵化方法中的孵化参数是：

①孵化温度：36～38℃；②孵化湿度：相对湿度为40～60％；③通风换气：保持孵蛋箱空气中的氧含量在21％以上；④翻蛋：每1～2小时翻蛋1次；⑤孵化至7～11天，取出孵化蛋后弃去蛋壳、鸡胚胎、蛋黄。

3.根据权利要求书1所述的鸡胚胎素制备方法，其特征是：常规孵化7～9天，然后将植物血凝素接种于尿囊腔中，继续孵化1～3天的方法是，将孵化7～9天的鸡胚用稀释至浓度0.1～100μg/ml的植物血凝素接种于尿囊腔中，每只鸡胚0.2ml，再常规孵化1～3天。 

4.根据权利要求书1所述的鸡胚胎素制备方法，其特征是：所述鸡胚成分粉碎的方法是将去除蛋壳、鸡胚胎、蛋黄后的鸡胚成分，主要成分包括尿囊液、羊水、尿囊液绒毛尿囊膜血管网在内的物质，置于低温冰柜中-20～-30℃冰冻，冰冻1～10小时后用粉碎机械将其粉碎至50～90目。

5.根据权利要求书1所述的鸡胚胎素制备方法，其特征是：所述的反复冻融是将打浆后的鸡胚成分置于低温冰柜中，将样品冷冻至-20～-30℃后，冰冻1～4小时，然后置于室温条件下自然融化至冰水共存时，再置于低温冰柜中，将样品冷冻至-20～-30℃，冰冻1～4小时，如此反复冻融3～5次。

6.根据权利要求书1所述的鸡胚胎素制备方法，其特征是：所述的过滤方法是将上述反复冻融后的鸡胚成分经过20目绢布过滤，然后再经过3μm过滤器过滤。