[发明专利]一种饲用复合微生物添加剂及其制备方法

权利要求书

1.一种饲用复合微生物添加剂，其特征是该添加剂中包含有两种芽孢杆菌。

2.如权利要求1所述的饲用复合微生物添加剂，其特征在于所述两种芽孢杆菌分别为：枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)K2008，在中国普通微生物菌种保藏管理中心的保藏编号为CGMCC No.4929；地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)DY01，在中国普通微生物菌种保藏管理中心的保藏编号为CGMCCNo.4930。

3.如权利要求2所述的饲用复合微生物添加剂，其特征在于添加剂中枯草芽孢杆菌K2008、地衣芽孢杆菌DY01菌种的质量配比为1∶1。

4.一种饲用复合微生物添加剂的制备方法，其特征在于制备工艺如下：将枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌按比例混合培养后，采用特定的发酵条件进行好氧发酵，制备发酵液，再采用后续处理工艺制成微生态制剂。

5.如权利要求4所述的饲用复合微生物添加剂的制备方法，其特征在于所述枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌混合培养，采用特定的发酵条件进行好氧发酵，制备发酵液，包括如下的步骤：

1)菌种活化：将保存的枯草芽孢杆菌K2008、地衣芽孢杆菌DY01菌种分别转接于新鲜的斜面培养基上，34℃培养16h。斜面培养基采用LB培养基：蛋白胨1％，酵母浸粉0.5％，NaCl1％，琼脂1％，自然pH。

2)种子液的制备：在超净工作台中将活化好的枯草芽孢杆菌K2008、地衣芽孢杆菌DY01菌种用接种环分别接于LB液体培养基中。均以34℃、175r/min摇床培养20h。

3)二联菌液的制备：在超净工作台中将步骤2)所得两种芽孢杆菌种子液均按1.5％的体积比接种到新的LB液体培养基中(总接种量为3％)，两种芽孢杆菌的质量配比为1∶1。34℃、175r/min摇床培养20h。

4)发酵液的制备：将步骤3)所得二联菌液按3％的体积比接种到装有25L发酵培养基的发酵罐中，控制装液量为60～70％，初始pH值7.2～7.5，搅拌转速100～150r/min，34℃需氧培养24h，然后逐级上500L中罐、5000L大罐。所述的发酵培养基配方为：每L含糖蜜(总糖含量53％)15mL，玉米粉(氮含量4.76％)15g，豆粕粉(氮含量6.94％)20g，CaCl₂2g，MgSO₄·7H₂O2g，pH7.2～7.5。

6.如权利要求4所述的饲用复合微生物添加剂的制备方法，其特征在于后续处理工艺采用如下几种方法进行：静置，离心，掺拌吸水性介质，干燥。

7.如权利要求6所述的饲用复合微生物添加剂的制备方法，其特征在于所述的静置方法将如权利要求5所述的发酵液静置处理36～48h，直至发酵液芽孢生成率达90％以上，即为合格。

8.如权利要求6所述的饲用复合微生物添加剂的制备方法，其特征在于所述的离心方法，条件为：管式离心机8000～10000r/min离心30～40min，得到二联芽孢杆菌菌泥。

9.如权利要求6所述的饲用复合微生物添加剂的制备方法，其特征在于所述的掺拌吸水性介质，为向权利要求8所述的二联芽孢杆菌菌泥中掺拌稻壳粉，其质量以刚好将菌泥完全包埋为准，吸干水分。

10.如权利要求6所述的饲用复合微生物添加剂的制备方法，其特征在于所述的干燥方法，将权利要求8中所述的菌泥、稻壳粉混合物置于烘干设备上，以25～30℃的低温将混合物烘干，得到粉剂。经质检合格后称重包装，即得产品。