[发明专利]一种低场高弛豫率MRI造影剂及其制备方法与应用

权利要求书

1.一种MRI造影剂，是由Gd-DTPA-HSA与富勒烯羧酸衍生物通过偶联反应制备得到的；所述富勒烯羧酸衍生物的分子表达式为C₆₀[C(COOH)₂]_x，其中，x＝2-4。

2.根据权利要求1所述的MRI造影剂，其特征在于：所述MRI造影剂是按照权利要求3-7中任一项所述方法制备得到的。

3.制备权利要求1所述的MRI造影剂的方法，包括下述步骤：

a)将权利要求1所述富勒烯羧酸衍生物溶于2-(N-吗啉基)乙磺酸缓冲液中，加入1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐和N-羟基琥珀酰亚胺，室温下反应，得到富勒烯羧酸活性酯溶液；

b)将Gd-DTPA-HSA加入到所述富勒烯羧酸活性酯溶液中搅拌反应，即得到所述MRI造影剂。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于：步骤a)中所述2-(N-吗啉基)乙磺酸缓冲液的pH值为4.7-6.0；所述富勒烯羧酸衍生物在所述2-(N-吗啉基)乙磺酸缓冲液中的浓度为1mg/mL。

5.根据权利要求3或4所述的方法，其特征在于：步骤a)中，所述富勒烯羧酸衍生物、1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐、N-羟基琥珀酰亚胺的摩尔比为1∶6∶6；所述反应的反应时间为2-4小时。

6.根据权利要求3-5中任一项所述的方法，其特征在于：所述方法还包括：将步骤b)得到的MRI造影剂使用Mw＝12,000-14,000透析袋透析除去小分子，之后使用Mw＝10,000的超滤离心管除去未反应的富勒烯羧酸衍生物的步骤。

7.根据权利要求3-6中任一项所述的方法，其特征在于：所述Gd-DTPA-HSA是按照下述方法制备得到的：

1)将100-200mg人血清白蛋白溶于5mLpH＝7.4的PBS缓冲液中，分批加入cDTPA，调节pH＝7，室温下反应2h；其中，所加入的cDTPA与人血清白蛋白的摩尔比200∶1；

2)反应结束后通过葡聚糖凝胶Sephadex G-25进行分离纯化，得到HSA-DTPA溶液；洗脱液：pH＝6.0且浓度为0.5M的CH₃COONa溶液；

3)将100-200mg GdCl₃·6H₂O加入到所述HSA-DTPA溶液中，室温下搅拌2-4h，使用Mw＝12,000-14,000透析袋透析除去小分子，之后使用Mw＝10,000的超滤离心管除去未反应的物质。

本发明公开了一种适用于低场磁共振成像的高效MRI大分子造影剂及其制备方法与应用。所述MRI大分子造影剂可按照包括下述步骤的方法制备：a)将富勒烯羧酸衍生物溶于MES缓冲液中，加入EDC和NHS，室温下反应，得到富勒烯羧酸活性酯溶液；b)将Gd-DTPA-HSA加入到所述富勒烯羧酸活性酯溶液中搅拌反应，即得到所述的MRI造影剂。该Gd-DTPA-HSA-fullerene大分子造影剂在低场(0.5T)条件下弛豫效率显著提高，可在减少造影剂的使用剂量条件下得到明显的组织对比度；更为重要的是将其作为一种MRI分子探针，可以用于探索纳米材料(如功能化富勒烯衍生物)的体内分布代谢行为。