[发明专利]人颅内生殖细胞肿瘤标志物基因HESRG的应用方法

说明书

技术领域

本发明属于基因工程领域，涉及人胚胎干细胞相关基因(HESRG)的新的应用方法。

背景技术

颅内生殖细胞肿瘤是远东地区(包括中国、日本)青壮年高发的一类恶性肿瘤，严重威胁着人民的生命安全。颅内生殖细胞肿瘤是由于在胚胎发育过程中，原始生殖细胞在迁移过程中受到某种因素的影响而迁移到了中枢神经系统的部位，从而导致了颅内生殖细胞肿瘤的发生。世界卫生组织(WHO)根据其病理特点将其分为：生殖细胞瘤，绒(毛)膜癌，卵黄囊瘤，胚胎癌及畸胎瘤五种。目前颅内生殖细胞肿瘤分子诊断的标志物主要有AFP(甲胎球蛋白)、HCG(人绒毛膜促性腺激素)、HPL(胎生乳素)、PLAP(人胎盘碱性磷酸酶)、c-Kit、OCT4、Cytokeratin(细胞角质蛋白)、Nanog等。虽然这些指标的单独或者联合应用为颅内生殖细胞肿瘤的诊断提供了有用的信息，但它们均缺乏足够的灵敏度和特异性：例如AFP是人类认识较早的、较有价值的肝癌和生殖细胞瘤肿瘤标志物，AFP在颅内生殖细胞肿瘤中主要表达在卵黄囊瘤、部分畸胎瘤及部分胚胎癌中，但同时其在消化道肿瘤(如胃癌、胰腺癌、结肠癌、胆管细胞癌等)中也具有较强表达，缺乏足够的特异性；HCG主要是妊娠期滋养层肿瘤和生殖细胞肿瘤的标志物，颅内生殖细胞肿瘤中主要在绒毛膜癌、部分生殖细胞瘤及部分胚胎癌中表达，同时其在乳腺癌、肺癌、胃肠道肿瘤等非妊娠期滋养层肿瘤和生殖细胞肿瘤中也有异常表达；HPL、PLAP、c-Kit、OCT4、Cytokeratin、Nanog等标志物均在多种生殖细胞肿瘤中表达或只在某类生殖细胞肿瘤中部分表达，且在其他非生殖细胞肿瘤中也有表达，均缺乏足够的特异性。而将上述各类标志物联合进行诊断时，由于各种标志物的表达存在较多重叠而缺乏较好的互补也很难达到理想的结果。

人胚胎干细胞相关基因(Human embryonic stem cell related gene，HESRG)是我们利用芯片筛选、电子克隆、RACE等方法在人胚胎干(ES)细胞中克隆和命名的一个人类新基因(Zhao M，Ren C(通讯作者)，Yang H，Feng X，Jiang X，Zhu B，Zhou W， Wang L，Zeng Y，Yao K.Transcriptional profiling of human embryonic stem cells and embryoid bodies identifies HESRG， a novel stem cell gene. Biochem Biophys Res Commun，2007，362(4)：916-922(IF2006＝2.855))，该基因在人ES细胞中高表达而在正常胎儿组织、成人睾丸组织、多种肿瘤(不包含生殖细胞肿瘤)和正常细胞系中均不表达，说明HESRG基因的表达具有特异性。由于ES细胞及原始生殖细胞都是多能性细胞；且克隆该基因过程中，发现EST序列BF223023来源于生殖细胞肿瘤，因此我们通过RT-PCR、Real-time PCR以及免疫组化等方法检测了其在中枢神经系统肿瘤内的表达情况，发现HESRG基因特异性表达于颅内生殖细胞瘤及胚胎癌中(表达阳性率达100％)，而在其他颅内的生殖细胞肿瘤及非生殖细胞肿瘤均不表达，说明HESRG是一种新型的特异性颅内生殖细胞瘤及胚胎癌的肿瘤标志物。与上述各种标志物相比，检测HESRG的表达对于诊断颅内生殖细胞瘤及胚胎癌具有更高的灵敏度、准确度和特异性，同时HESRG与AFP、HCG等上述标志物的表达具有较好的互补性，利用HESRG与上述一种或者两种标志物进行联合诊断，可以准确地诊断各种类型的生殖细胞肿瘤。因此，HESRG作为颅内生殖细胞肿瘤的特异性标志物在临床诊断上拥有巨大的应用价值。

发明内容

本发明的目的在于提供一种人颅内生殖细胞肿瘤(胚胎癌和生殖细胞瘤)标志物HESRG基因在制备诊断和治疗颅内生殖细胞肿瘤的产品上的应用方法。

人颅内生殖细胞肿瘤标志物基因HESRG用于制备诊断和治疗人颅内生殖细胞肿瘤的产品；特别是用于制备诊断人颅内生殖细胞肿瘤的产品。

所述的产品包括用RT-PCR、Real-time PCR、免疫检测、原位杂交或基因芯片等方式诊断人颅内生殖细胞肿瘤的产品。

所述的用RT-PCR诊断人颅内生殖细胞肿瘤的产品至少包括一对特异扩增引物。

所述的用Real-time PCR诊断人颅内生殖细胞肿瘤的产品至少包括一对特异扩增引物。

所述的用免疫检测诊断人颅内生殖细胞肿瘤的产品包括与HESRG基因编码蛋白结合的抗体。