[发明专利]一种抑制移植器官慢性排斥反应的抗体的制备及纯化方法在审
申请号: | 201110223524.3 | 申请日: | 2011-08-05 |
公开(公告)号: | CN102911270A | 公开(公告)日: | 2013-02-06 |
发明(设计)人: | 曹利平;丁国平 | 申请(专利权)人: | 浙江大学 |
主分类号: | C07K16/18 | 分类号: | C07K16/18;C07K1/20 |
代理公司: | 杭州裕阳专利事务所(普通合伙) 33221 | 代理人: | 冉国政 |
地址: | 310027 浙*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 抑制 移植 器官 慢性 排斥 反应 抗体 制备 纯化 方法 | ||
【权利要求书】:
1.一种抑制移植器官慢性排斥反应的抗体的制备及纯化方法,其特征在于包括以下步骤:
步骤一:
用淋巴细胞分离液收集外周血单核细胞,体外培养扩增,20ng/ml rMICA诱导培养,收集培养细胞;
步骤二:
用细胞核蛋白与细胞浆蛋白抽提试剂盒提取单个核细胞蛋白质;
步骤三:
串联高效液相层析(HPLC)纯化抗MICA抗体:它利用不同分离模式的结合,使混合物中的肽得到更大程度的分离,并且降低低丰度肽的丢失;
步骤四:
抗MICA抗体的鉴定:利用rMICA,用Western Blot进行反向验证。
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