[发明专利]一株饲用丁酸梭菌及其应用

说明书

技术领域

本发明属于微生物菌株，特别是涉及一株丁酸梭菌菌株及其在制备饲料及饲料添加剂中的应用。

背景技术

丁酸梭菌(Clostridium butyricum)又称酪酸梭菌或丁酸梭状芽孢杆菌，是存在于人和畜禽肠道的一种厌氧有益菌。丁酸梭菌能形成内生芽孢，具有耐高温、耐胃酸、耐胆盐、耐部分抗生素(如庆大霉素、卡那霉素等)等特性。丁酸梭菌制剂作为饲料添加剂或兽药，与非芽孢类活菌制剂相比具有显著优势。

目前，有关丁酸梭菌的研究和应用还处于初级阶段，专利文献CN 101851596A公开了一株高效解磷的丁酸梭菌及其制备方法和应用；专利文献CN 1246144A公开了一种对肝脏损害具有治疗和预防效果的丁酸梭菌；专利文献CN 1995330A公开了一种丁酸梭状芽孢杆菌微生态制剂的生产方法；专利文献CN 1771831A公开了一种饲料级微生物添加剂及其制备与应用，所述的微生物添加剂主要包括益生菌部分和营养液部分，所述的益生菌部分含有嗜酸乳杆菌、粪肠球菌、丁酸梭菌，所述的营养液部分含有乙酸、丙酸、丁酸；专利文献CN 1403567A公开了一种制备乳酸芽孢、丁酸芽孢杆菌活菌制剂的新方法，利用酶生物技术处理植物蛋白原料制得培养基，用于乳酸芽孢、丁酸芽孢杆菌单独发酵培养，发酵物经离心、赋形、常温以上温度干燥制得乳酸芽孢、丁酸芽孢杆菌的干粉活菌制剂。上述专利文献中公开的丁酸梭菌微生态制剂均未涉及丁酸梭菌先进行厌氧液态发酵、再用固体物料(麸皮、豆粕、稻壳等)吸附、最后烘干的工艺。

发明内容

本发明的目的是提供一株对致病菌具有抑制作用的可用于制备饲料和饲料添加剂的丁酸梭菌。

本发明所提供的丁酸梭菌(Clostridium butyricum)菌株的名称为B1，该菌株已于2011年05月16日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.4845。

丁酸梭菌(Clostridium butyricum)B1 CGMCC No.4845是革兰氏阳性杆菌，光学显微镜下观察，其大小为(0.6～1.2)μm×(3.0～7.0)μm，端圆，中间部分轻度膨胀，单个或成对，短链，偶见有丝状菌体，周生鞭毛，能运动；孢子卵圆，偏心或次端生芽孢；在厌氧琼脂平板上形成白色或奶油色的小规则圆形菌落；在厌氧条件下生长，生长温度范围：20℃～60℃，最适生长温度：30℃～42℃；生长酸碱度范围：pH 2～10，最适pH值为7.0；部分生化特性如表1所示：

表1丁酸梭菌(Clostridium butyricum)B1 CGMCC No.4845的部分生化特性

注：“+”表示反应阳性；“-”表示反应阴性。

体外拮抗试验结果表明：丁酸梭菌(Clostridium butyricum)B1 CGMCC No.4845对大肠杆菌(Escherichia coli O139、E.coli K88、E.coli K99)、伤寒沙门氏菌(Salmonella typhimurium O4Hi)和金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)等均有很强的抑制作用。

丁酸梭菌(Clostridium butyricum)B1 CGMCC No.4845可耐受pH 1.0～3.0磷酸盐缓冲液3h；可耐受浓度为0.5％(质量百分比浓度)的胆盐20h。

丁酸梭菌(Clostridium butyricum)B1 CGMCC No.4845对氨苄青霉素、硫酸链霉素、红霉素和氯霉素敏感，对庆大霉素和卡那霉素耐受能力较强。

急性毒性试验结果表明小鼠对丁酸梭菌(Clostridium butyricum)B1 CGMCCNo.4845的最大耐受剂量MTD＞15000mg/kg，根据分级标准，该菌株为无毒物质。

本发明的第二个目的是提供一种丁酸梭菌(Clostridium butyricum)B1 CGMCCNo.4845在饲料中应用的微生态制剂。

本发明所提供的微生态制剂，其活性成分为丁酸梭菌(Clostridium butyricum)B1 CGMCC No.4845。

所述微生态制剂中还可添加有豆粕、麸皮和稻壳中一种或几种。

本发明的另一个目的是提供一种上述微生态制剂的制备方法。