[发明专利]一种用吸附色谱法从结晶母液中回收截短侧耳素的方法

说明书

技术领域

本发明涉及的是一种用吸附色谱法从截短侧耳素结晶母液中回收截短侧耳素的方法，属抗生素的分离纯化技术领域。

背景技术

截短侧耳素能够有效抑制大部分革兰氏阳性菌及部分革兰氏阴性菌，密螺旋体(螺旋杆菌)、细螺旋体和支原体等。截短侧耳素溶点:170～172℃，在甲醇、乙醇、氯仿和丙酮中溶解。截短侧耳素是一种由侧耳菌产生的一类广谱的二萜类抗生素，其分子结构式为：

截短侧耳素的市场应用主要分为三类：一、主要用于生产衍生物如泰妙菌素、沃尼妙林，约占到89%；二、其次是直接添加到动物饲料里，预防和治疗革兰氏菌、支原体及螺旋体引起的感染，占比例为8%；三、少量用于合成人用抗生素Retapamulin的试验研究。

我国是畜牧业大国，养殖经济动物的群体数量庞大，对动物用截短侧耳素有旺盛的需求基础。但国内截短侧耳素产业发展滞后，工艺技术水平也较落后。现有技术生产流程依次为：发酵、过滤、丙酮提取、浓缩、二氯甲烷溶解、浓缩、结晶、离心、干燥、成品。截短侧耳素产品纯度：92～93％，提取率：82～84％，结晶母液中还残留16～18％截短侧耳素。

截短侧耳素结晶母液中，截短侧耳素含量在20～25％，其余是部分溶剂和大部分的低熔点油溶性杂质，残留的截短侧耳素难以再结晶，又因为杂质含量较大，造成分离纯化的难度较大，往往将这种结晶母液当作废弃物处理，既浪费了资源，降低了截短侧耳素的收率，增加了生产成本，又造成了环境污染。截短侧耳素结晶母液中截短侧耳素的回收利用未见相关的文献报道。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是，提供一种用吸附色谱法从结晶母液中回收截短侧耳素的方法，这种方法工艺简单、成本低、满足环保要求，可以高收率高纯度地回收截短侧耳素成品。

为达到上述目的，采用的技术方案是：一种用吸附色谱法从结晶母液中回收截短侧耳素的方法，其特征在于依次包括步骤：

⑴配制上柱液：以重量份计，取一份截短侧耳素结晶母液真空浓缩，逐渐升温至90°，直至无馏出液为止，加入0.5-2份水溶性有机溶剂，搅拌均匀后备用；

⑵上柱吸附：将步骤⑴所得上柱液通过泵加入装填非极性大孔吸附树脂柱中，流速控制1-2倍柱体积/小时；

⑶解吸：取体积百分数为20%-70%的水溶性有机溶剂配置洗脱剂，将三倍柱体积的洗脱剂泵入吸附树脂柱中解吸，流速为1倍柱体积/小时；

⑷后处理：将步骤⑶解吸所得的洗脱液，真空浓缩，回收溶剂，蒸干水分，浓缩物加入有机溶剂溶解、再结晶、真空干燥得成品。

步骤⑴和步骤⑶所述水溶性有机溶剂，可以举出甲醇，乙醇，正丙醇，异丙醇，叔丁醇，二恶烷，四氢呋喃，丙酮，二甲基甲酰胺，二甲亚砜中的一种。

步骤⑵所述非极性大孔吸附树脂为市售比表面积不小于400m²/g,细孔体积不小于1ml/g的大孔吸附树脂HZ816,或HZ818，或HZ830。

步骤⑷所述有机溶剂是乙酸乙酯，甲基异丁酮，二氯甲烷中的一种。

本发明的有益效果是：吸附色谱法从截短侧耳素结晶母液中回收截短侧耳素的方法，工艺简单、生产成本低，从结晶母液中残留截短侧耳素回收率达85-92%，使得截短侧耳素总的生产提取率达到95-98%，从而提高了工业生产效率。

具体实施方式

下面结合实施例，对本发明作进一步的说明，说明本发明涉及的技术方案，揭示本发明的最佳实施方式，使本领域的普通技术人员能够应用实施本发明。但应当理解，本发明并不限于下述实施例，基于本发明的启示，任何显而易见的变换或等效替代，也应当被认为是落入本发明的保护范围。

实施例中，玻璃色谱柱内径75mm，长1000mm，充填6000ml非极性大孔吸附树脂HZ816、或HZ818、或HZ830，比表面积不小于400m²/g,细孔体积不小于1ml/g（市售上海华震科技有限公司产品）。

在色谱处理过程中，色谱柱洗脱过程中可连续进行，或间歇处理。

高效液相色谱法测定产品纯度的检测条件为：高效液相色谱 (岛津VP-ODS，C18色谱柱250mmX 4.6mm，5μm)，流动相为乙腈∶水为4∶1，流速为1.0mL/min，柱温为30⁰C，进样量为10uL，检测波长：210nm，检测器:紫外检测器。 

实施例1: