[发明专利]一种昆虫体外标记液及其配制方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种在对昆虫种群数量动态、行为特点、活动规律等相关生物特性进行研究时，在昆虫体外附着的标记液及其配制方法。

背景技术

标记－重捕技术是昆虫生物、生态、行为学等基础研究中的应用技术之一。它是指在特定区域内，为了某项研究需要，收集一定数量的靶标昆虫进行个体标记，然后放回自然种群经过混群后，重新捕获一定数量的个体，再依据统计学原理，利用其中重捕的标记样本数据，分析研究对象的种群数量动态、行为特点、活动规律等相关生物特性。目前，最为先进的昆虫体内标记技术是运用RAPD标记、RFLP标记、分子标记等遗传学手段的技术，但成本高昂，国内尚处于实验室研究阶段。在农林害虫、卫生昆虫等研究领域对靶标昆虫体内采用稀有金属、放射性同位素标记技术，个别种类可将标记物加入人工饲料饲喂，实现体内标记。也有用体外用荧光剂等标记物进行标记，也有用油漆、记号笔着色标记或在虫体加上附着物进行标记的。用稀有金属、放射性同位素体内标记适应对象广泛，但受标记物来源、检测设备条件和操作步骤复杂、使用成本高的制约，只在特殊的研究对象中才使用，染色剂饲料人工饲喂的方法，仅适用于成虫阶段需要补充营养的种类或幼虫对添加物能承受的种类，应用不具备广泛性。体外荧光剂标记物使用成本低于稀有金属、放射性同位素标记，但使用时需要通过检测设备测试荧光反应，操作步骤复杂、流程长，只能选择性应用。用油漆、记号笔着色或用附加物标记，虽然经济、操作便捷，但只适用于体壁坚硬的某些种类如鞘翅目等中、大体型昆虫种类。由于油漆标记物重且含有机溶剂，其溶剂挥过程会对昆虫体壁形成伤害、影响昆虫飞行运动，会导致试验数据缺失或失真。记号笔涂抹操作会给昆虫形成损伤，无法对小型鳞翅目成虫进行可靠、准确标记。

发明内容

本发明的目的，就是要提供一种不仅适用于体壁柔软如鳞翅目成虫体外标记、亦可广泛用于其他种类成虫体外标记的水溶性昆虫体外标记液及其配制方法，使该标记物使用便捷、成本低廉，标记操作不妨害靶标昆虫生物行为、不影响研究结果，标记物清晰，重捕后不需借助其他设备识别、辨认可靠，方便野外适时调查。本发明的技术解决方案是这样的：一种昆虫体外标记液，其特征在于昆虫体外标记液是由以下原料按重量比配制的：生物染色剂0.2 -1.0份、吐温0.5-1.5份、蒸馏水80-120份。昆虫体外标记液的配制方法，其特征在于是按以下步骤配制的：Ａ　将生物染色剂溶于蒸馏水，振荡溶解；B，将吐温溶于步骤Ａ的混合液中，振荡至溶解，即为昆虫体外标记液。其最佳的原料重量比是：生物染色剂；0.5份、吐温-40； 1份、蒸馏水；100份。生物染色剂使用酸性品红、快绿CF、；结晶紫等生化染色材料中任意一种，可配制出各种颜色的昆虫体外标记液。吐温（聚氧乙烯失水山梨醇脂肪酸酯）为非离子表面活性剂，具有乳化、扩散、增溶、稳定等作用，能形成吸附界面膜，降低表面张力，有助于染色材料的扩散、稳定着色。蒸馏水为稀释剂、易蒸发、无残留。标记液手工加载于靶标昆虫体上的标记物在气干状态下，可控制的重量约＜0.0005g，其质量不至于干扰到靶标昆虫行为。使用本发明的有益效果是；标记液的操作不会对靶标昆虫有任何化学毒害、物理损伤、生理干扰，不影响靶标昆虫飞行活动、取食和交配产卵等正常生物习性，不会破坏动物的主要体色，不影响其自然生存，保障跟踪靶标取得的数据自然属性。标记液在靶标体附着牢固，野外不会被雨水冲刷或在日照等自然条件下消失，即在研究期间标记物保持稳定，使用性能可靠。标记液的原材料来源方便，配制方法简单、安全、使用操作便捷，靶标对象重捕后对样本标记物检查鉴定方法准确可靠、成本低廉。

以下数据，是在4年8个世代的林间使用，释放后在第6天重捕靶标的记录，表明标记后的靶标成虫马尾松毛虫在野外生存正常。

具体实施方式

实施例1

将生物染色剂（酸性品红、快绿CFC、结晶紫中的任意一种）0.3份、溶于80份的蒸馏水中，进行振荡溶解，再将0.8份吐温-20溶于生物染色剂和蒸馏水的混合液中，进行振荡溶解后，即为昆虫体外标记液。

如将生物染色剂中的酸性品红0.3克、溶于80克的蒸馏水中，进行振荡溶解，再将0.8克的吐温-20溶于酸性品红和蒸馏水的混合液中，进行振荡溶解后，即为红色的昆虫体外标记液。

实施例2

将生物染色剂（酸性品红、快绿CFC、结晶紫中的任意一种）0.5份、溶于100份的蒸馏水中，进行振荡溶解，再将1份吐温-40溶于生物染色剂和蒸馏水的混合液中，进行振荡溶解后，即为昆虫体外标记液。