[发明专利]一种检测普洱茶或普洱茶提取物中茶多糖的检测方法

权利要求书

1.一种普洱茶或普洱茶提取物中茶多糖的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤1，配制葡萄糖标准溶液作为对照；

步骤2，将普洱茶或普洱茶提取物样品经醇沉、酸水解和聚酰胺柱分离，配制成检测液；

步骤3，用紫外分光光度法测定标准对照品溶液和检测液的吸光度，绘制标准曲线；

步骤4，计算普洱茶或普洱茶提取物样品中茶多糖含量。

2.根据权利要求1的检测方法，其特征在于，其中，步骤1中的葡萄糖标准溶液为D-无水葡萄糖。

3.根据权利要求1的检测方法，其特征在于，其中，步骤1中的配制葡萄糖标准溶液包括以下步骤：取D-无水葡萄糖对照品，加水溶解并稀释制成每1ml中含0.2mg的溶液，作为对照品溶液。

4.根据权利要求1的检测方法，其特征在于，其中，步骤2中的将普洱茶样品配制成检测液，包括以下步骤：取普洱茶2g，置250ml烧瓶中，分别加入10-30ml沸水浸提2-4次，每次5-20min，合并滤液；加乙醇调整至乙醇含量60-90％；过滤，用热浓度为60-90％乙醇洗涤滤渣2-4次，20-40ml/次，挥干溶剂，滤纸连同滤渣一起置烧瓶中，加20-80ml水，加热回流0.5-1.5h，趁热过滤，用60-100℃热水洗涤，合并滤液，定容至100ml；精密吸取5ml提取溶液，加入盐酸溶液，混合液中盐酸的浓度为0.2-1.0mol/L，在30-70℃下水解15-60min，冷却后调pH至中性；将酸水解后的多糖提取液置聚酰胺层析柱中，用60-100℃热水洗脱，收集滤液，定容至100ml，作为供试品溶液；

或取普洱茶提取物1g，置250ml烧瓶中，加60-90％乙醇20-80ml，80-95℃水浴回流15-60min，趁热滤过，用热60-90％乙醇洗涤2-4次，20-40ml/次，挥干溶剂，滤纸连同滤渣一起置烧瓶中，加20-80ml水，加热回流0.5-1.5h，趁热过滤，用热水洗涤，合并滤液，定容至100ml；精密吸取5ml提取溶液，加入盐酸溶液，混合液中盐酸的浓度为0.2-1.0mol/L，在30-70℃下水解15-60min，冷却后调pH至中性；将酸水解后的多糖提取液置聚酰胺层析柱中，用60-100℃热水洗脱，收集滤液，定容至100ml，作为供试品溶液。

5.根据权利要求4的检测方法，其特征在于，其中，步骤2中的将普洱茶提取物样品配制成检测液，包括以下步骤：取普洱茶2g，置250ml烧瓶中，分别加入20ml沸水浸提3次，每次10min，合并滤液；加乙醇调整至乙醇含量80％；过滤，用热浓度为80％乙醇洗涤滤渣3次，30ml/次，挥干溶剂，滤纸连同滤渣一起置烧瓶中，加50ml水，加热回流1h，趁热过滤，用60-100℃热水洗涤，合并滤液，定容至100ml；精密吸取5ml提取溶液，加入盐酸溶液，混合液中盐酸的浓度为0.5mol/L，在40℃下水解30min，冷却后调pH至中性；将酸水解后的多糖提取液置聚酰胺层析柱(15cm×2cm)中，用70-90℃热水洗脱，收集滤液，定容至100ml，作为供试品溶液；

或取普洱茶提取物1g，置250ml烧瓶中，优选80％乙醇50ml，95℃水浴回流30min，趁热滤过，用热80％乙醇洗涤3次，30ml/次，挥干溶剂，滤纸连同滤渣一起置烧瓶中，加50ml水，加热回流1h，趁热过滤，用热水洗涤，合并滤液，定容至100ml；精密吸取5ml提取溶液，加入盐酸溶液，混合液中盐酸的浓度为0.5mol/L，在40℃下水解30min，冷却后调pH至中性；将酸水解后的多糖提取液置聚酰胺层析柱(15cm×2cm)中，用70-90℃热水洗脱，收集滤液，定容至100ml，作为供试品溶液。

6.根据权利要求1的检测方法，其特征在于，其中，步骤3中用紫外分光光度法测定包括以下步骤，将葡萄糖标准溶液和检测液分别加入5％的苯酚溶液1.0ml，振摇混匀，加5.0ml硫酸，用微型漩涡混合仪迅速振摇混匀，室温下放置30分钟，以第1管为空白，照中国药典2005年版一部附录VB紫外-可见分光光度法，在487nm波长处测定吸光度。