[发明专利]小桐子快速繁殖方法

说明书

技术领域

本发明涉及生物组培育苗技术领域，尤其涉及一种小桐子快速繁殖方法。

背景技术

小桐子（Jatropha curcas L.），又叫麻疯树、麻风树、膏桐、黑皂树、木花生、油芦子、亮桐、臭梧桐等，属大戟科（Euphorbiaceae）麻疯树属（Jatropha L.），落叶灌木或小乔木，是一种多年生木本油料植物。小桐子原产美洲，广泛分布于热带亚热带地区。

小桐子可全株开发，其果实、枝、叶均能利用。小桐子种子含油率高，经过加工可制成生物柴油。小桐子种子、树皮、叶、根和乳汁中含有多种成分的生物药源，可提取制作生物医药和生物农药。小桐子种子加工后的油饼蛋白质含量较高，脱毒后可制作生物饲料,未脱毒的可制作优质的有机生物肥。另外，小桐子茎叶有毒，牲畜不吃，病虫较少，不易燃烧，可作为田间地边的生物篱和防风防火屏障。培育小桐子能源林，利用其种子提炼生物柴油是小桐子产业发展的主要方向。

我国现有栽培和半野生的小桐子，其繁殖主要靠种子繁殖和扦插繁殖，繁殖周期长、成本高。又因其为木本植物，采用常规育种来改变其遗传性状相当困难，因此采用现代生物技术如转基因技术等成为首选。一些国家和地区已经开始了对小桐子进行了分子水平的育种工作。选育的优良品种大量繁殖，通过组培方式快速繁殖小桐子将在小桐子选育种生产上有重要的应用价值。

目前，关于小桐子的组织培养及快速繁殖的报道较多，例如：陆伟达、魏琴、唐琳等发表的《麻疯树愈伤组织的诱导及快速繁殖》（《应用与环境生物学报》，2003，9（2）：127~130.）以及陈金洪、高敏、黄记生发表的《麻疯树茎段离体培养及快速繁殖研究》（《广西农业科学》，2006，37（3）：221~223.）等论文均涉及小桐子的组织培养及快速繁殖技术。但是，现有技术存在以下不足：

1、均采用不同的激素浓度组合诱导愈伤组织和芽分化，未经过再生芽增殖，其增殖速率低；

2、均采用不同外植体诱导愈伤组织，其不同外植体诱导频率相差及大。

采用上述方法不能达到工厂化生产的需要，另有研究者进行了腋芽快繁研究，例如：李化、曾妮、贾勇炯等人发表的《麻疯树的促腋芽分枝快繁及生根诱导》（《四川大学学报:自然科学版》，2006，43（5）：1116~1120.），所用外植体为种子萌发的胚芽来诱导增殖。但尚未见公开采用再生芽来诱导增殖的繁殖技术。

发明内容

本发明实施例所要解决的技术问题在于，提供一种小桐子快速繁殖方法，以通过组织培养大规模高效地生产小桐子。

为解决上述技术问题，本发明提供如下技术方案：一种小桐子快速繁殖方法，包括如下步骤：

准备再生芽步骤，以小桐子成熟种子为材料，经培育获得无菌再生芽；

增殖诱导步骤，将再生芽切下，接入增殖培养基进行增殖培养，从而获得增殖的丛芽；

伸长培养步骤，将增殖后的丛芽切下，接入伸长培养基进而获得茎叶伸长的均匀的芽；

壮苗培养步骤，将伸长后的芽接入壮苗培养基进行壮苗培养；

生根移栽步骤，选取壮苗培养后茎叶生长均匀的芽切下，用吲哚丁酸浸泡后再接入生根培养基进行生根培养，生出符合移栽要求的根后进行炼苗移栽。

进一步地，所述诱导增殖步骤中，增殖培养基的成分为：MS+0.1~2 mg/L 6-苄基嘌呤+0.01~2 mg/L吲哚丁酸+0~5 mg/L的硝酸银，附加3%蔗糖和0.7%琼脂，pH5.8。

进一步地，所述诱导增殖步骤中，培养条件是：温度控制在24~26℃，光照时间为12 h/d培养20~50天，光照强度为1600~2000 lx。

进一步地，所述伸长培养步骤中，伸长培养基成分为：MS +0.1~2 mg/L 6-苄基嘌呤和0~1 mg/L的赤霉素，附加3%蔗糖和0.7%琼脂，pH5.8。

进一步地，所述伸长培养步骤中，培养条件是：温度控制在24~26℃，光照时间为12 h/d培养10~30天，光照强度为1600~2000 lx。

进一步地，所述壮苗培养步骤中，壮苗培养基中含有：MS+0.1~2 mg/L 6-苄基嘌呤+0.01~2 mg/L 吲哚丁酸+0~5 mg/L的硝酸银+0~10 %椰汁。

进一步地，所述壮苗培养步骤中，培养条件为：温度控制在24~26℃，光照时间为12 h/d培养10~30天，光照强度为1600~2000 lx。