[发明专利]一种早期乳腺癌血清诊断试剂及其检测方法

权利要求书

1.一种早期乳腺癌血清诊断试剂，其特征在于：所述诊断试剂以FTH1，或者FTH1联合hnRNPF为诊断标志物，可检测分离的待测血清中FTH1抗体，或者FTH1与hnRNPF的对应抗体，用于乳腺癌早期诊断或术后疗效监测。

2.一种早期乳腺癌血清诊断试剂，其特征在于：包括FTH1 ELISA板，该FTH1 ELISA板先由应用乳腺癌T7噬菌体特异表达的FTH1抗原或商业化购得的FTH1抗原包埋酶标板，4℃过夜，洗涤后 5％BSA/PBS室温封闭2 小时形成；还包括可配合FTH1 ELISA板对待测血清进行检测的HRP偶联的山羊抗人IgG、显色剂A、B和终止液；FTH1 ELISA板可由酶标仪于450 nm波长处读取OD值，以先后经噬菌体、鼠抗噬菌体一抗和羊抗鼠HRP二抗包被的加样孔作为阴性对照孔，以未包被噬菌体的加样孔作为空白对照孔；用空白对照孔调零后，根据FTH1 ELISA板待测血清OD值/阴性对照平均OD值的比值进行判断，比值≥2.0，判断为阳性，比值＜2.0，判断为阴性，阴性对照OD值低于0.05作0.05计算，高于0.05按实际OD值计算。

3.如权利要求2所述的一种早期乳腺癌血清诊断试剂，其特征在于：还包括hnRNPF ELISA板，该hnRNPF ELISA板先由应用乳腺癌T7噬菌体特异表达的hnRNPF抗原或商业化购得的hnRNPF抗原包埋酶标板，4℃过夜，洗涤后 5％BSA/PBS室温封闭2 小时形成；还包括可配合hnRNPF ELISA板对待测血清进行检测的HRP偶联的山羊抗人IgG、显色剂A、B和终止液；hnRNPF ELISA板可由酶标仪于450 nm波长处读取OD值，以先后经噬菌体、鼠抗噬菌体一抗和羊抗鼠HRP二抗包被的加样孔作为阴性对照孔，以未包被噬菌体的加样孔作为空白对照孔；用空白对照孔调零后，根据hnRNPF ELISA板待测血清OD值/阴性对照平均OD值的比值，结合FTH1 ELISA板待测血清OD值/阴性对照平均OD值的比值，进行判断，阴性对照OD值低于0.05作0.05计算，高于0.05按实际OD值计算。

4.一种进行乳腺癌早期诊断或术后疗效监测的方法，其特征在于：包括以下步骤：

（1）配液：应用乳腺癌T7噬菌体特异表达FTH1抗原制成T7 噬菌体液，或者直接商业化购买FTH1抗原液，或者直接商业化购买FTH1抗原粉制成FTH1抗原液；

（2）FTH1 ELISA板的制备： 将T7 噬菌体液或FTH1抗原液包被于酶标板，4℃过夜；经洗涤后，5％BSA/PBS室温封闭2 小时；

（3）标本收集和处理：抽待测外周血，分离待测血清；

（4）FTH1 ELISA板的检测：在酶标板的每孔中加入1:100稀释的待测血清室温孵育1 小时；洗涤后加入1:10 000稀释的HRP偶联的山羊抗人IgG，室温放置1 小时；洗涤后加入显色剂A、B各1滴，37℃孵育15 分钟，立即加入终止液；

（5）读板：在酶标仪下450 nm波长处读取OD值；

（6）根据OD值的阴性、阳性判断结果：以先后经噬菌体、鼠抗噬菌体一抗和羊抗鼠HRP二抗包被的加样孔作为阴性对照孔，以未包被噬菌体的加样孔作为空白对照孔；用空白对照孔调零后，根据FTH1 ELISA板待测血清OD值/阴性对照平均OD值的比值进行判断，比值≥2.0，判断为阳性，比值＜2.0，判断为阴性，阴性对照OD值低于0.05作0.05计算，高于0.05按实际OD值计算。