[发明专利]一种菜粕中提取的芥子油甙的精制方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种菜粕中提取的芥子油甙的精制方法。

背景技术

芥子油甙(glucosinolates，GLS)是油菜、芥菜等十字花科植物中一类重要的次生代谢产物，目前已经报道的芥子油甙超过120种。研究表明，芥子油甙及其降解产物具有形成独特风味、抑制杂草及病虫害、抗肿瘤等有效功能，因而近年来对芥子油甙及其降解产物的研究已引起人们的广泛关注。但由于芥子油甙种类繁多，导致其单体很难分离。吴谋成等用弱离子交换剂DEAE即Spehadx A-25阴离子交换树脂作固定相，K₂SO₄作流动相，采用自动柱色谱仪分离制备非吲哚类硫代葡萄糖苷和吲哚类硫代葡萄糖苷结晶粗品，并从非吲哚类硫代葡萄糖苷结晶粗品中进一步分离和纯化，制得2-羟基-3-丁烯基硫代葡糖糖苷和3-丁烯基硫代葡萄糖苷的钾盐晶体。

目前，从菜粕中提取的芥子油甙都是粗提物，附加值低，应用受到限制。

发明内容

本发明是为了克服现有技术中的不足之处，提供一种菜粕中提取的芥子油甙的精制方法，为芥子油甙的分离提纯提供一种新的途径，提高芥子油甙的纯度，扩大芥子油甙的应用。

本发明通过下述技术方案实现：

一种菜粕中提取的芥子油甙的精制方法，其特征在于，包括下述步骤：

(1)D201GF树脂的预处理：将D201GF树脂用质量百分比浓度为4％的HCl溶液浸泡4h，之后，将HCl溶液浸泡后的D201GF树脂水洗至pH值为2-3，再用质量百分比浓度为2％的NaOH溶液浸泡4h，之后将NaOH溶液浸泡后的D201GF树脂水洗至pH值为8-10，备用；

(2)精制：将菜粕以80％甲醇为提取剂，在70℃提取4h，料液比为1∶10，制成含有芥子油甙的初提液，之后过滤除去杂质，收集滤液；用滤纸吸干步骤(1)预处理后的D201GF树脂表面，加入到上述收集的含有芥子油甙的滤液中，50℃水浴加热条件下磁力搅拌4h使树脂充分吸附芥子油甙；静置分层，取上清液加入显色液，震动摇匀，再加入蒸馏水制成上清液的浓度为2.22％的溶液，之后放入沸水浴中加热30min，取出，冷水浴冷却至室温，得到已经充分吸附芥子油甙的D201GF树脂；其中，D201GF树脂与含有芥子油甙的滤液的质量体积比为1∶20；

(3)芥子油甙的洗脱：向步骤(2)得到的已经充分吸附芥子油甙的D201GF树脂中加入浓度为1mol/L的NaCl溶液，搅拌30分钟进行洗脱，洗脱液即为芥子油甙的提取物。

本发明具有下述技术效果：

本发明的方法能够对菜粕中提取的芥子油甙进行精制，为芥子油甙的纯化提供了一种新的途径，产品纯度高，附加值高，应用范围广。而且，原料来源广泛，价格低廉，降低了芥子油甙的提取纯化成本，为芥子油甙的普通应用提供了可能性。

具体实施方式

以下结合具体实施例对本发明进行详细说明。

实施例

(1)D201GF树脂的预处理：将D201GF树脂用质量百分比浓度为4％的HCl溶液浸泡4h，之后，将HCl溶液浸泡后的D201GF树脂用水洗至pH为2-3，再用质量百分比浓度为2％的NaOH溶液浸泡4h，之后将NaOH溶液浸泡后的D201GF树脂水洗至pH为8-10，备用。

(2)精制：将菜粕以80％甲醇为提取剂，70℃提取4h，菜粕与80％甲醇的质量比为1∶10，制成含有芥子油甙的初提液，之后过滤除去杂质，收集滤液；用滤纸吸干步骤(1)预处理后的D201GF树脂表面，加入上述收集的含有芥子油甙的滤液中，50℃水浴加热条件下磁力搅拌4h使树脂充分吸附芥子油甙。静置分层，取其1mL上清液于50mL容量瓶内，加入5mL显色液，震动摇匀，蒸馏水定容至刻度，在沸水浴中加热30min，取出，冷水浴冷却至室温，得到已经充分吸附芥子油甙的D201GF树脂。

(3)芥子油甙的洗脱：

将已经充分吸附芥子油甙的D201GF树脂2g置于100mL三角瓶中，加入浓度为1mol/L的NaCl溶液50mL，搅拌30分钟进行洗脱，洗脱液即为芥子油甙的提取物。

高效液相色谱法分析芥子油甙提取物

1、流动相的制备：

称量三乙胺0.5060g，加适量蒸馏水溶解，用50mL容量瓶，加蒸馏水定容，摇匀，即配得0.1mol/L三乙胺溶液。吸取5mL三乙胺溶液于棕色试剂瓶中，加入500mL甲醇与水比例为1∶9的混合液。同样方法再配制甲醇与水比例为3∶7的流动相。两瓶流动相均用0.45μm的滤膜过滤，备用。

2、色谱分析