[发明专利]一种枯草芽孢杆菌发酵生产天蚕素抗菌肽的方法

权利要求书

1.一种枯草芽孢杆菌发酵生产天蚕素抗菌肽的方法，包括：

（1）摇瓶培养：按照配方配制1.5L培养基，平均分装于20个1000ml三角烧瓶中，高温灭菌冷却后，用试管菌种接种，接种量1：500，摇床培养，搅拌速度为225rpm/min， 温度37℃， 培养时间12小时；培养基配方为：

蛋白胨   15g

酵母提取物  7.5g

食盐       7.5g

用蒸馏水定容至1.5L； 

（2）发酵罐发酵：按照配方配制20m³培养基，高温灭菌冷却至37℃，移种量1:70，pH 5.5～6.0，温度37℃，补料前通气量0.6：1、补料后通气量0.8：1、补料8小时后至放罐通气量1.2：1，搅拌速度为80～90 rpm/min，每2小时取样检测，OD₆₀₀在0.6～1时补料，整体发酵时间为24～26小时，培养基配方为：

玉米：3%

豆粕：1.8%

蛋白胨：1%

硫酸铵：1%

葡萄糖：0.3%

磷酸二氢钾： 0.3%

麦芽糖： 5.5%

消泡剂： 0.02%。

2.根据权利要求1所述的天蚕素抗菌肽基因转化枯草芽孢杆菌生产方法，其特征在于：发酵生产时菌种用量超过10L时，在摇瓶培养后和发酵罐发酵前进行种子罐培养，按照配方配制300L培养基，高温灭菌冷却至37℃，接种方式为火焰接种，接种量1:200，pH6.0～7.0，温度37℃，搅拌速度为35～40rpm/min，每2小时取样检测一次，OD₆₀₀在0.6～1时补料，发酵时间为20～24小时；培养基配方为：

玉米面：3%  

豆粕：1.8%

蛋白胨：1%

硫酸铵：1%

葡萄糖：0.3%

磷酸二氢钾：0.3%

消泡剂：0.02%。

3.根据权利要求1或2所述的天蚕素抗菌肽基因转化枯草芽孢杆菌发酵生产方法，其特征在于：培养基组分中的固形物与液体的比例为10%。