[发明专利]高氮酵母及其制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及酿酒酵母及其制备方法。 

背景技术

面包酵母在分类学上属于酿酒酵母。酵母是一种单细胞微生物，其形态为圆形、椭圆形、卵圆形，大小随菌种的差异而不同。 

酵母细胞中含水分65%-70%，其中约有15%为游离水；含碳水化合物为25%-35%，大多以多糖形式存在；含蛋白质40%-60%，酵母含有完整的氨基酸群，包括人体必需的8种氨基酸，特别是在谷物蛋白中含量较少的赖氨酸，在酵母中含量较高。此外，酵母中的氨基酸比例接近联合国粮农组织(FAO)推荐的理想氨基酸组成值，故其营养价值较高。灰分5%-10%，大多以磷和钾的含量较多。酵母也是天然的营养来源和营养载体，其营养成分具有“三低四优”的特点，即低脂、低糖、不含胆固醇，富含优质完全蛋白质、完整的B族维生素、以生命结合态形式存在的多种矿物质和功能膳食纤维。 

在自然界中，所选育的酵母存在自身蛋白含量低、生物量积累缓慢等缺点。因此有必要对酵母细胞进行诱变和筛选，最终得到蛋白含量高，生物量积累快的优良菌种。为今后工业化生产奠定坚实的基础。 

目前所使用的微生物菌种选育技术主要包括物理方法如：紫外线诱变，化学方法如，亚硝基胍、氯化锂、硫酸乙二酯（DES）等单一诱变或几种物质相结合诱变的方法。采用上述的物理、化学方法均存在着工作量大，诱变效率低下等诸多问题。且对菌种自身会产生不同程度的抗性。另一种主要采用基因工程育种的方法，主要包括原生质体融合技术、DNA重组技术。原生质体融合技术是目前最常用也是最有效的菌种诱变手段之一，优点是细胞结构简单，生长迅速，所需设备简单，操作方便。缺点是突变率低，诱变剂效果不稳定。DNA重组技术其优点在于目的性强，能按照人们意愿改造目的基因。但缺点在技术难度大，mRNA贮存时间短，操作过程复杂。 

发明内容

本发明的目的在于避免现有技术的不足提供一种高氮酵母。利用重离子辐照诱变得到高氮酵母，为酵母工业化提供优良菌种。 

本发明的又一目的在于提供一种高氮酵母的制备方法。 

为实现上述目的，本发明采取的技术方案为：一种高氮酵母，是Saccharomyces cerevisiae酿酒酵母，由中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，保藏号为CGMCC No 5004，保藏日期为2011年6月29日；经重离子辐照诱变，其含氮量为40-60%。 

高氮酵母的制备方法，其主要特点是包括以下步骤： 

（1）    准备菌种：Saccharomyces cerevisiae酿酒酵母：

（2）    制备固体培养基按质量百分比葡萄糖3.0%-5.0%、蛋白胨0.5%-1.0%、酵母浸出粉0.2-1.0%、NH₄SO₄0.2%-3%、MgSO₄0.03%-1.5%、KH₂PO₄0.2%-1.5%，琼脂0.5%-1.5%，其余为水；

（3）    制备液体培养基：按质量百分比葡萄糖3.0%-5.0%、蛋白胨0.5%-1.0%、酵母浸出粉0.2-1.0%、NH₄SO₄ 0.2%-3%、MgSO₄ 0.03%-1.5%、KH₂PO₄ 0.2%-1.5%，其余为水；

（4）    斜面培养：将培养皿内的单菌落挑取后接入到已灭好菌的所述的固体培养基斜面上，25-35℃静置培养；

（5）    种子培养：挑取斜面菌种接入到已灭好菌的所述的液体培养基中，液体培养基为pH4-6，在25-35℃的温度下，摇床培养8-12小时，摇床转速为100-300r/min，接种量为5%-10%；

（6）    重离子辐照处理：待菌悬液肉眼观察浑浊进行1比98-102比例稀释，对菌悬液进行重离子辐照诱变，辐照剂量为：20Gy-100Gy；

（7）    酵母菌种若保藏时间较长需要在-80℃保藏，若是斜面保藏在4℃保藏。

一种高氮酵母的制备方法，其主要特点是包括以下步骤： 

（1）准备菌种：Saccharomyces cerevisiae酿酒酵母：