[发明专利]一种肝干细胞保存液及其应用

说明书

技术领域

本发明涉及一种肝干细胞保存液及其应用。

背景技术

″糖尿病″是一种血液中的葡萄糖容易堆积过多的疾病。国外给它的别名叫″沉默的杀手″(Silent Killer)，特别是″成人型糖尿病″，四十岁以上的中年人染患率特别高，在日本，四十岁以上的人口中占10％，即十人当中就有一位″糖尿病″患者。一旦患上″糖尿病″，将减少寿命十年之多，且可能发生的并发症遍及全身。″糖尿病″本身亦给人带来非常的痛苦，让人常常觉得口干想喝水，因多尿而半夜多次醒来，尽管已吃了不少食物仍觉饥饿感，体重减轻、嗜睡等等，总让人觉得周身哪处不对劲。等到能够感觉到某处的明显情况时，″糖尿病″的病情已发展到一定程度了。而可怕的并发症亦随之悄悄地在全身各处发展着。

肝干细胞是一种来源于肝脏Herring狭隙和肝内胆管的具有双向分化潜能的细胞，能够分化为肝实质细胞和胆管上皮细胞。这种细胞的细胞质少，具有卵圆形细胞核，故×称卵圆细胞(Oval)。在正常的情况，这种卵园细胞是静止的，数量很少。在肝细胞严重及持续性肝损伤中，肝细胞的增殖能力减弱，这种称为卵圆细胞的肝干细胞亚群被激活增殖。肝干细胞对糖尿病是有作用的，但具有个体差异，有的人通过介入肝干细胞后停止服用胰岛素，有的人胰岛素减量。

虽然肝干细胞能通过多种途径形成胰岛素分泌细胞，但肝干细胞向胰腺细胞转分化的机制还不清楚。有人认为可能肝、胰腺和小肠共同来源于内胚层的细胞，或者存在有这样一个相邻的区域，在发育过程中或在某种刺激条件下，这个区域的细胞能够被重编程或退分化再转分化形成完全不同于正常组织的表型。这不排除另一种可能：成体组织中存在一小群多能的干细胞，它们具有向多个系统分化的能力。

发明内容

本发明的目的是提供一种肝干细胞保存液及其应用。

本发明提供的肝干细胞保存液，是将0.1-1g有效剂量的人血白蛋白、2.60-4.97g氯化钠、2.48-4.74g葡萄糖酸钠、1.82-3.40g醋酸钠、0.18-0.35g氯化钾、0.15-0.28g氯化镁和0.4-0.7mL肝素钙注射液用水定容至100mL得到的。

本发明提供的肝干细胞保存液，优选为是将0.2-1g有效剂量的人血白蛋白(如0.2-0.4g有效剂量的人血白蛋白或0.4-1.0g有效剂量的人血白蛋白)、4.18-4.97g氯化钠(如4.18-4.71g或4.71-4.97g)、3.99-4.74g葡萄糖酸钠(如3.99-4.49g或4.49至4.74g)、2.90-3.40g醋酸钠(如2.90-3.29g或3.29-3.40g)、0.29-0.35g氯化钾(如0.29-0.33g或0.33-0.35g)、0.24-0.28g氯化镁(如0.24-0.27g或0.27-0.28g)和0.5-0.7mL肝素钙注射液(如0.5-0.6mL或0.6-0.7mL)用水定容至100mL得到的。

所述人血白蛋白可以以人血白蛋白注射液的形式加入，也可以以人血白蛋白冻干粉的形式加入。

肝素钙具有防止细胞聚集成团的功能。

本发明提供的肝干细胞保存液用于保存肝干细胞，在12小时以内细胞存活率为85％以上，甚至达到95％以上。

所述肝干细胞保存液可用于保存肝干细胞，特别是离体的肝干细胞，优选为离体的人肝干细胞。

本发明还保护一种保存肝干细胞的方法，是将肝干细胞悬浮于所述肝干细胞保存液，4-8℃保存12小时以下(如4-6℃保存12小时或6-8℃保存12小时)；所述肝干细胞和所述肝干细胞保存液的配比为6×10⁵-7×10⁵个肝干细胞活细胞：1mL肝干细胞保存液(如6×10⁵-6.8×10⁵个肝干细胞活细胞：1mL肝干细胞保存液，或6.8×10⁵-7×10⁵个肝干细胞活细胞：1mL肝干细胞保存液)。所述肝干细胞可为离体的肝干细胞，优选为离体的人肝干细胞。