[发明专利]一种邻苯二甲酸酯类物质总量的测定方法

说明书

技术领域

本发明属于液相色谱分析技术领域，具体涉及一种邻苯二甲酸酯类物质总量的测定方法。

背景技术

邻苯二甲酸酯(Phthalic Acid Esters，简称PAEs，别名酞酸酯)是一类重要的有机化合物质，由于可增加塑料的可塑性及强度，被广泛应用于玩具、食品包装材料、医用血袋和胶管、乙烯地板和壁纸、清洁剂、润滑油、个人护理用品(如指甲油、头发喷雾剂、香皂和洗发液)等数百种产品中。

在塑料中PAEs与聚烯烃类塑料分子之间由氢键或范德华力连接，彼此保留各自相对独立的化学性质，随着时间、温度等条件的变化逐渐从塑料向食品中迁移，从而导致食品的污染，尤其是油脂类食品。邻苯二甲酸酯可通过呼吸道、消化道和皮肤等途径进进人体，经过体内代谢，其代谢产物包括邻苯二甲酸单酯、羟基化产物和氧化产物，在尿苷5’-二磷酸葡糖醛酸基转移酶的催化作用下生成亲水的葡糖苷酸结合物而排出，代谢物总类繁多，已在人的尿液、乳汁、血液和精液等体液中检测出邻苯二甲酸酯，该类化合物已被确认为环境雌激素，对人的生殖系统有损害。目前已经有气相、液相、气-质联用、液-质联用等方法对邻苯二甲酸酯类化合物进行检测，这些方法由于灵敏度高、分离效果好以及定量分析紧密度高的优点而被广泛使用，但这些方法均是对某种或某几种邻苯二甲酸酯类进行检测，但因邻苯二甲酸酯是一类物质，包括的种类数量很多，国内外明确规定一些产品是不能含的，而且即使使用，种类也不一样，很难将邻苯二甲酸酯类化合物一一检测出来，而且代谢物成分复杂，因此建立一种方法可以检测邻苯二甲酸酯类物质总量不仅可以有效评估食品尤其是油类食品是否受到邻苯二甲酸酯增塑剂的污染，而且可以为邻苯二甲酸酯人体的内暴露评价提供技术支持，目前，国内外并没有相关的研究报道，因此，建立一种测定邻苯二甲酸酯类物质总量的方法将填补这一领域的空白。

发明内容

本发明的目的在于克服现有检测邻苯二甲酸酯类物质方法的不足，提供一种邻苯二甲酸酯类物质总量的测定方法。该方法将邻苯二甲酸酯类物质全部转化为邻苯二甲酸，通过检测邻苯二甲酸的量进而计算邻苯二甲酸酯总量，操作简单可靠。

本发明的上述目的通过如下技术方案予以实现：

一种邻苯二甲酸酯类物质总量的测定方法，包括如下步骤：

(1)前处理：将样品制成溶液后在碱的存在下，进行碱解；碱解后以用酸进行酸化，往酸化后的溶液采用乙酸乙酯萃取，萃取液蒸干后以甲醇复溶，有机滤膜过滤，得到样品液；

(2)含量测定：以高效液相色谱对样品液中邻苯二甲酸的含量进行测定；

(3)标准曲线和线性回归方程：制备邻苯二甲酸标准溶液，并通过高效液相分析得到邻苯二甲酸标准物质峰面积-质量浓度标准曲线和线性回归方程，将步骤(2)所测定的含量按照标准曲线换算，即可计算样品中邻苯二甲酸酯类物质的总量。

作为一种优选方案，步骤(1)中，所述碱解为将样品溶于甲醇中，以氢氧化钾溶液为碱，在80～100℃下进行碱解。

作为一种最优选方案，步骤(1)中，所述碱解为将样品与甲醇混匀，加入氢氧化钾溶液，在85℃水浴加热2.5h，最后将甲醇蒸干，取出冷却至室温。

作为一种优选方案，步骤(1)中，所述酸化优选将体系的pH值调至1～2。

作为一种最优选方案，步骤(1)中，所述酸化优选为以体积比为1∶1的盐酸水溶液为酸，将体系的pH值调至1～2，漩涡震荡3分钟后，超声波震荡20分钟。

作为一种优选方案，步骤(1)中，所述乙酸乙酯萃取优选为先采用正己烷进行萃取，除去正己烷层，再往余液中加入乙酸乙酯进行萃取，得到乙酸乙酯的萃取液。

作为一种更优选方案，所述有机溶液萃取更优选为往酸化后的溶液中，加入3倍体积的正己烷，漩涡震荡3分钟，静置，除去正己烷层，余液中加入3倍体积的乙酸乙酯，漩涡震荡3分钟，静置，分离出乙酸乙酯层，重复乙酸乙酯提取步骤2次，合并三次所得的乙酸乙酯萃取液，除去乙酸乙酯，得到邻苯二甲酸。正己烷的作用是可以除去水解后生成的脂肪酸以及一些弱极性和非极性的物质。

作为一种优选方案，步骤(2)中，高效液相色谱条件优选为：紫外检测器，检测波长为230nm；XB-C18型色谱柱；甲醇与25mmol/L磷酸氢二钾组成的缓冲溶液作为流动相；进行梯度洗脱；流速1.0ml/min；柱温40℃，进样量10μL。

作为一种优选方案，所述样品优选为油类或富脂样品。

作为一种更优选方案，所述样品更优选为食用油、方便面调味酱料或黄油。