[发明专利]基于克鲁斯假丝酵母的甘油生产工艺

权利要求书

1.一种克鲁斯假丝酵母菌株TS1008(Candida krusei TS1008)，其特征在于，于2011年8月10日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC No：M2011285。

2.一种根据权利要求1所述的耐高温克鲁斯假丝酵母菌株的制备方法，其特征在于，通过诱变与训育方法的结合，经筛选得到。

3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征是，所述的诱变是指：采用紫外灯照射进行诱变。

4.根据权利要求2或3所述的制备方法，其特征是，所述的诱变为：将100mL种子培养基/250mL三角瓶中，挑斜面培养基上保存的克鲁斯假丝酵母菌1环，30-35℃，90-120r/min培养16-20h，离心收集菌体，无菌生理盐水洗涤数次，稀释后备用，取4mL菌悬液，15-20W紫外灯功率，照射10-20s。

5.根据权利要求2所述的制备方法，其特征是，所述的训育是指：将诱变后的菌悬液接入含400-500g/L葡萄糖和70-90g/L渗透剂的筛选培养基中，黑纸包皿，35℃-45℃恒温培养46-52h，重复3次。

6.根据权利要求4所述的制备方法，其特征是，所述的筛选培养基的组分含量为：400-500g/L葡萄糖或70-90g/L渗透剂，麦芽汁200-300mL，琼脂15-20g/L，余量为水，pH 5.0-6.5。

7.根据权利要求4所述的制备方法，其特征是，所述的种子培养基的组分含量为：葡萄糖30-45g/L，酵母10-16g/L，植物蛋白12-22mL/L，余量为水，pH 4.0-5.5。

8.根据权利要求4所述的制备方法，其特征是，所述的筛选培养基的组分含量为：400-500g/L葡萄糖或70-90g/L渗透剂，麦芽汁200-300mL，琼脂15-20g/L，余量为水，pH 5.0-6.5。

9.根据权利要求4或5所述的制备方法，其特征是，所述的斜面培养基的组分含量为：麦芽汁200-300mL/L，琼脂15-20g/L，余量为水。

10.一种根据上述任一权利要求所述耐高温克鲁斯假丝酵母突变菌株的应用，其特征在于，将该突变菌株用于甘油生产，通过将所述突变菌株好氧发酵得以实现。

11.根据权利要求10所述的应用，其特征是，所述的好氧发酵是指：通过培养突变菌株得到成熟发酵液后通过膜过滤系统逐级除去杂质，再使用反渗透进行脱水浓缩，得到粗甘油，经减压蒸馏提取，脱味、脱色得到成品甘油。

12.根据权利要求11所述的应用，其特征是，所述的培养是指：将突变菌株接种于种子培养基中在35℃-45℃的环境下培养16h得到种子液，然后转接到发酵培养基中好氧发酵50-80h，得到成熟发酵液。

13.根据权利要求12所述的应用，其特征是，所述的接种是指：接种量8％-15％(v/v)。

14.根据权利要求12所述的应用，其特征是，所述的发酵培养基的组分含量为：葡萄糖200-400g/L，酵母6-12g/L，植物蛋白200-300mL/L，余量为水，pH 4.0-5.5。

15.根据权利要求12所述的应用，其特征是，所述的好氧发酵是指：在20％-40％糖液浓度，通风比0.5-1，35℃-45℃温度下发酵50-80h。

16.根据权利要求11所述的应用，其特征是，所述的减压蒸馏是指：真空度为2mmHg-120mmHg的减压蒸馏提取。