[发明专利]苯巴比妥快速检测试纸条

说明书

技术领域：本发明涉及一种快速检测微量镇静类药物的器具，特别是涉及一种快速检测微量苯巴比妥的试纸条。

技术背景：

现代养殖业为人类提供了丰富的肉、禽、奶、蛋等营养价值高的各种食品，改善了人类的饮食结构，提高了人类的物质生活和健康水平，为延长人类的寿命作出了贡献。与此同时，现代科学研究证明，养殖业中大量使用饲料添加剂，以及防病治病需要，大量使用抗生素、激素及其它合成药物，在促进动物生长、降低动物发病率与死亡率、提高饲料利用率的同时，也造成了动物性食品中药物残留和激素残留。另外由于科学知识的缺乏和经济利益的驱使，在养殖业中非法使用违禁药物、滥用抗菌药和饲料添加剂、不遵守休药期、配伍禁忌等有关规定的现象普遍存在，在我国情况亦为严重。滥用药物的直接后果是导致药物在动物性食品中的残留增加，并通过食物链的传递进入人体，对人类的生命健康构成威胁和危害。如癌症发病率增加，人类生育畸形比例增加，人体抗药性增强，青少年性早熟和某些食物中毒等现象，往往与动物性食品中药物、激素残留增加密切相关。

苯巴比妥（Phenobarbital，简称PB）又名鲁米那，也叫迦地那，具有镇静、催眠、抗惊厥、抗癫痫等药效作用，临床上主要用于治疗焦虑、失眠、癫痫发作、运动障碍、高胆红素血症等疾病。PB具有很强的毒副作用，过量服用可抑制中枢神经系统，造成急性死亡；长期服用可导致眩晕困倦、运动失调、剥落性皮炎、肺功能不全、肝肾损害等副作用。另外还具有致畸作用，可引起胎儿腭裂和兔唇，影响智力发育。由于PB具有镇静、催眠等特殊的生物学功能，常被非法用于饲料添加剂，在肉猪饲料添加剂生产中应用更为严重，其药物残留严重危害着人们的身体健康和生命安全。因此各国政府都严禁PB用作饲料添加剂。2002年我国农业部、卫生部、国家药品监督管理局根据《饲料和饲料添加剂管理条例》、《兽药管理条例》、《药品管理法》的规定，联合发布公告，公布了《禁止在饲料和动物饮用水中使用的药物品种目录》（农业部公告第１７６号），苯巴比妥名列其中，要求对饲料生产、经营、使用和动物饮用水中非法使用违禁药物的违法行为严厉打击。但目前尚未建立国家检测标准，PB用作饲料添加剂的现象仍然存在，PB残留中毒事件时有发生，动物性食品中PB残留对人体的危害愈来愈引起人们的重视。

目前用于精神类药品的监测方法主要是理化检测法，包括高效液相色普法（HPLC）, 气-质联用法（GC/MS）, 液-质联用法（LC/MS）等，这些方法检测苯巴比妥灵敏度高，特异性强，但是样品需经一系列复杂的处理净化，繁琐费时，从样品预处理到得出检测结果至少需要2天时间；同时这种检测方法需要大型专门仪器设备和专业技术人员操作，无法进行现场检测，时效性差，难以推广。另外免疫学检测方法主要是酶联免疫吸附法（ELISA），以竞争性酶联反应为检测原理，反应显色后用酶标仪测OD值，OD值越低表示被检样品中苯巴比妥含量越高。检测过程约2～4小时，大大缩短了检测时间，降低了检测费用，既可定性又可定量检测，但是出现假阳性或假阴性的概率较大。由于ELISA是一种敏感性很强的检测方法，不同的操作者往往会出现不同的结果，所以该方法常常造成人为的误检和漏检。目前苯巴比妥免疫学检测方法在国内尚属空白，急待研究解决。

发明内容：

本发明的目的：研制出特异、灵敏、快速、简便的快速检测微量苯巴比妥的试纸条。

本发明的技术方案是：

该试纸条底层为支撑层，中间层为吸附层，保护层固定在吸附层上，吸附层从测试端依次为测试端吸附纤维层、吸附金标抗体纤维层、纤维素膜层及手柄端的吸水材料层，其中在纤维素膜层上有用偶联苯巴比妥的载体蛋白溶液印制的直线式检测印迹，用羊抗或兔抗小鼠IgG，或羊抗兔IgG抗体溶液印制的直线式对照印迹；

测试端吸附纤维层用玻璃纤维棉、尼龙膜、聚偏二氟乙烯（PVDF）膜、或聚酯膜；金标抗体纤维层用吸附苯巴比妥的金标抗体玻璃纤维棉，苯巴比妥金标抗体为胶体金标记的苯巴比妥单克隆抗体或多克隆抗体，偶联苯巴比妥的载体蛋白溶液为苯巴比妥与载体蛋白偶联的复合物溶液；纤维素膜层用硝酸纤维素膜、纯纤维素膜或羧化纤维素膜；

偶联苯巴比妥的载体蛋白为牛血清白蛋白（BSA），或鸡卵清白蛋白（OVA），或为匙孔血蓝蛋白（KLH），在纤维素膜层上设有直线式检测印迹和直线式对照印迹，两印迹平行排列组合为“︱︱”；