[发明专利]一种L-色氨酸分批补料发酵工艺

权利要求书

1.一种L-色氨酸分批补料发酵工艺，其特征在于，该方法依次包括以下步骤：

1）制备斜面菌种，将L-色氨酸菌种接入斜面培养基，在30℃下培养72h，制得斜面菌种；

2）制备摇瓶种子，将斜面菌种接入药瓶活化培养基中进行斜面活化，于30℃培养24h，制备成摇瓶种子；

3）将摇瓶种子接入装有种子培养基的一级种子罐中，在26℃下培养24h，制备成一级种子；

4）发酵，将一级种子按体积比1%的接种量接种于装有发酵培养基的发酵罐中发酵，其培养基葡萄糖的浓度为90g/L，发酵24h之后，向发酵培养基中流加160g/L的葡萄糖，同时向发酵培养基中流加一定的氮源，维持碳氮平衡，发酵期间使用无菌空气保持发酵罐通风，自发酵开始60小时后培养成熟。

2.根据权利要求1所述的一种L-色氨酸分批补料发酵工艺，其特征在于，所述步骤1）的斜面培养基组成为：蛋白胨10g、牛肉膏10g、酵母膏5g、NaCl 2.5g、琼脂条20g，该培养基的pH为7.2。

3.根据权利要求1所述的一种L-色氨酸分批补料发酵工艺，其特征在于，所述步骤2）的种子培养基组成为：葡萄糖1g、蛋白胨10g、牛肉膏10g、酵母膏5g、NaCl 2.5g、琼脂条20g，该培养基的pH为7.2。

4.根据权利要求1所述的一种L-色氨酸分批补料发酵工艺，其特征在于，所述步骤3）的种子培养基组成为：葡萄糖5g，蛋白胨10g，牛肉膏10g，酵母膏5g，NaCl 2.5g，该培养基的pH为7.2。

5.根据权利要求1所述的一种L-色氨酸分批补料发酵工艺，其特征在于，所述步骤5）发酵的第12h和24h各补加一次的L-苯丙氨酸、L-酪氨酸使得发酵液中两者浓度为50mg/L。

6.根据权利要求1所述的一种L-色氨酸分批补料发酵工艺，其特征在于，所述步骤5）发酵过程中用氢氧化钠或氨水控制pH为7.2。