[发明专利]一种苏云金杆菌液态发酵培养基的制备方法有效
申请号: | 201110258526.6 | 申请日: | 2011-09-03 |
公开(公告)号: | CN102286413A | 公开(公告)日: | 2011-12-21 |
发明(设计)人: | 张灵玲;吴松青;彭艳;关雄;张小娟;黄冬梅;兰艳娇;洪冬华 | 申请(专利权)人: | 福建农林大学 |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;C12R1/07 |
代理公司: | 福州元创专利商标代理有限公司 35100 | 代理人: | 蔡学俊 |
地址: | 350002 福*** | 国省代码: | 福建;35 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 苏云金杆菌 液态 发酵 培养基 制备 方法 | ||
1.一种苏云金杆菌液态发酵培养基的制备方法,其特征在于操作步骤如下:
1)菌糠的预处理:将脱袋后的杏鲍菇菌糠于50~90℃条件下干燥至含水重量百分率不高于15%,进而粉碎成直径不大于5 cm的碎块;取粉碎后的菌糠10~30 kg,加入100~200 L重量体积比为1%~5%的强酸,60~100℃下浸泡0.5~2.5 h,同时用搅拌机以不低于2 rpm的速度搅拌;向所形成的渣液中加入碱调节pH至6.5~7.5,转移至分离槽,去渣后,浊液进入压滤机进行板框压滤或离心机离心,收集滤液,制成菌糠浸提液;
所述强酸是H2SO4或HCl;所述碱是CaO、或NaOH、或Ca(OH)2;所述板框压滤,指过滤压力不大于0.45 MPa,过滤温度不高于80℃;所述离心机离心,指离心转速不低于900 rpm,离心时间不少于5 min;
2)培养基成分补充:在经预处理的菌糠提取液中加入4~8 kg黄豆饼粉、0.125~0.325 kg尿素、0.1~0.3 kg KH2PO4、0.125~0.325 kg CaCO3、0.1~0.25 kg MgSO4或MgCl2、0.01~0.025 kg MnSO4或MnCl2、0.1~0.25 L TritonX-100,用水定容至500 L;搅拌均匀后在种子罐或发酵罐中经每平方英寸为15磅压力,121℃灭菌20~30 min,制成苏云金杆菌液态发酵培养基。
2.根据权利要求1所述的一种苏云金杆菌液态发酵培养基的制备方法,其特征在于操作步骤如下:
1)菌糠的预处理:将脱袋后的杏鲍菇菌糠于90℃干燥至含水重量百分率为10%,进而粉碎成直径为3cm的碎块;取粉碎后的菌糠20kg,加入200 L重量体积比为1%的H2SO4,于100℃浸泡2 h,并以2 rpm的速度搅拌;用Ca(OH)2调节所形成渣液的pH至7,然后转移至分离槽;去渣后,浊液进入压滤机进行板框压滤,过滤压力为0.3 MPa,过滤温度为50℃,获得菌糠浸提液;
2)培养基成分补充:在经预处理的菌糠提取液中加入黄豆饼粉6 kg、NH4NO3 0.225 kg、CaCO3 0.25 kg、KH2PO4 0.2 kg、MgSO4 0.1 kg、MnSO4 0.01 kg、TritonX-100 0.1 L,初始pH 7.0,加水定容至500 L,搅拌均匀并经每平方英寸为15磅压力,121℃灭菌21 min后,制成苏云金杆菌液态发酵培养基。
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