[发明专利]一种用酵母菌酿造的葡萄醋及其制备方法

权利要求书

1.一种用酵母菌酿造的葡萄醋的制备方法，其特征在于按以下步骤进行：1）原料酒的备物：葡萄的采收、破碎、酒精发酵，酿酒贮存；

2）醋酸菌种子液的制备：将毕赤酵母菌种移到无菌水中稀释至10ˉ⁴～10ˉ⁵ 倍，制备平板分离培养基按重量百分比：葡萄糖10%，蛋白胨 2% ，酵母膏1% ，琼脂1.5%加入要酿造的葡萄酒至100%，培养基在无菌条件下先加入4%酒精，将稀释至10ˉ⁴～10ˉ⁵倍浓度的醋酸菌1mL分成0.1mL个点滴在培养基上，送至30℃恒温箱培养，培养5天后出现醋酸菌菌落，选取单菌落直径最大的，取出再稀释至10ˉ⁴～10ˉ⁵倍，再重复培养三次；然后将生长较快的菌种取出用无菌水稀释至10ˉ⁴～10ˉ⁵倍，进行印迹法培养，印迹法培养基组成按重量百分比：葡萄糖10%，蛋白胨2%，酵母膏1%，Caco₃ 2%，琼脂1.5%，加入要酿造的葡萄酒至100%；将稀释至10ˉ⁴～10ˉ⁵倍浓度的菌种按每滴0.1mL点滴在备制好的印迹法培养基上，将培养基放入30℃恒温箱培养3～5天后，将产酸能力强、并生长健壮的醋酸菌选出进行第二次的印迹法培养，至3～4次的印迹法培养后，产出稳定的醋酸菌种，将这个菌种经Ⅰ级、Ⅱ级菌种培养扩繁后得种子液备用； 

3）双层喷淋塔填料的准备：填料用粉碎后的葡萄枝干、粗木梢、刨花、甘蔗渣，经水洗、煮沸后20分钟，滤去煮水，再次煮沸，滤去煮水，晒干后，加入体积百分比5～10% 2）步骤得到的种子液与填料拌和，然后填充到双层喷淋塔中，种子液百分比基数为填料总容量；

4）葡萄酒的制备：将贮罐中葡萄酒泵入巴氏灭菌机，灭菌后进入保温罐保温25～30分钟后，泵入冷却罐，当温度达到30～40℃后，再泵入双层喷淋塔酿造，喷淋头将葡萄酒均匀的喷在葡萄酒表面，边喷淋边将葡萄酒泵入深层通气发酵罐中，待喷淋结束，搅拌并进行深层通气发酵，发酵温度28～40℃，待醋酸度到不低于6°时，将醋灭菌后即可放入成品罐。

2.根据权利要求1所述的用酵母菌酿造的葡萄醋的制备方法，其特征在于所用毕赤酵母菌的保藏登记号为：CGMCC No.3076,分类命名为：巴氏毕赤酵母（Pichia  pastoris）。

3.用权利要求1所述的用酵母菌酿造的葡萄醋的制备方法制备的葡萄醋。

4.一种用于权利要求1所述的用酵母菌酿造的葡萄醋的设备，其特征在于由贮罐、巴氏灭菌机、保温罐、冷却罐、双层喷淋塔、发酵罐、灭菌机、成品罐组成，通过连接管道和输入泵按上述顺序依次连接。

5.根据权利要求4所述的用酵母菌酿造的葡萄醋的设备，其特征在于双层喷淋塔由塔体、在塔体内的两层填充料层和在填充料层上部的旋转喷淋头构成，每层填充料层有8个通气孔周边均分。