[发明专利]羟基磷灰石基生物复合支架及组织工程骨

权利要求书

1.羟基磷灰石基生物复合支架，其特征在于：是由羟基磷灰石、丝素蛋白和壳聚糖构成的，其中，各组分的质量比为HA∶SF∶CS＝(60～80)∶(10～20)∶(10～20)，复合支架呈多孔状，孔隙率为70～90％，孔径尺寸150～200μm，以圆形为主，孔与孔之间相互贯通。

2.根据权利要求1所述的羟基磷灰石基生物复合支架的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)将桑蚕茧去蛹、清洗，按照浴比(10～20)∶1置于0.01～0.1mol/L的碳酸钠溶液中煮沸30～90min，然后用去离子水洗涤、干燥，得到丝素蛋白；

(2)按最终产物中HA∶SF∶CS＝(60～80)∶(10～20)∶(10～20)的比例，将上述脱胶处理后的丝素蛋白溶于氯化钙-乙醇-水三元溶液中，50～90℃搅拌20～60min，至完全溶解，得丝素蛋白溶液，备用；其中，三元溶液中，氯化钙∶乙醇∶水的摩尔比为1∶2∶8；

(3)以氯化钙为钙源，按照羟基磷灰石中Ca/P摩尔比为1.67配置磷酸氢二铵溶液，其中，磷酸氢二铵的浓度为0.5～2mol/L；

(4)按最终产物中HA∶SF∶CS＝(60～80)∶(10～20)∶(10～20)的比例，将上述磷酸氢二铵溶液逐滴加入到丝素蛋白溶液中，30～90℃下机械搅拌反应1～6h，再在室温下静置陈化10～48h，反应过程中通过氨水调节并控制反应液的pH值在8～11；反应结束后，用蒸馏水洗涤至中性后再用无水乙醇洗涤，干燥，得到羟基磷灰石/丝素蛋白复合粉体；

(5)向上述所得的羟基磷灰石/丝素蛋白复合粉体中加入无水乙醇，搅拌成糊状，得羟基磷灰石/丝素蛋白无水乙醇胶体，其中，羟基磷灰石/丝素蛋白复合粉体与无水乙醇的质量比为1∶(0.5～2)；

(6)按最终产物中HA∶SF∶CS＝(60～80)∶(10～20)∶(10～20)的比例称取壳聚糖，按照壳聚糖∶乙酸溶液质量比1∶(15～20)将其溶解于乙酸浓度为0.01～0.04g/mL的乙酸溶液中；

(7)将上述配置好的壳聚糖乙酸溶液加入到步骤(5)中的羟基磷灰石/丝素蛋白无水乙醇胶体中，搅拌，超声分散，得到均匀的复合溶胶；

(8)按质量比(羟基磷灰石+丝素蛋白+壳聚糖)∶氯化钠＝1∶(0.5～2)，(丝素蛋白+壳聚糖)∶京尼平＝1∶(10～50)的比例，将粒径为150～250μm的氯化钠颗粒以及京尼平加入到上述复合溶胶中，搅拌、注模，室温下静置10～24h，然后置于真空干燥箱中干燥，得复合材料；

(9)将所得复合材料脱模后，室温下置于去离子水中浸泡1～4h，然后真空干燥；重复该步骤3～5次，然后将氯化钠颗粒沥滤干净，即得到羟基磷灰石基生物复合支架。

3.一种由权利要求1所述的羟基磷灰石基生物复合支架构建的组织工程骨，其特征在于：是由转染VEGF基因的BMSCs植入羟基磷灰石基生物复合支架上构建而成的。