[发明专利]一种利用细丽毛壳菌发酵制备右旋糖酐酶粗酶的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种右旋糖酐酶的制备方法，尤其涉及一种利用细丽毛壳菌发酵制备右旋糖酐酶粗酶的方法。 

技术背景

关于减少右旋糖酐生成对制糖生产过程以及产品质量的影响，目前国内主要以加强甘蔗新鲜度与在生产过程中注意清洁卫生及使用杀菌剂为主，但甘蔗从田头到整个生产过程，经历的时间一般在3～7天左右，微生物的繁殖是不可避免的。右旋糖酐的生成，影响制糖生产操作，减少蔗糖收回率，影响产品质量。利用右旋糖酐酶将右旋糖酐分解成小分子糖类，是一种有效的降低右旋糖酐对制糖过程影响的有效方法。 

焦曲霉、淡紫拟青霉、绳状青霉、毕赤酵母等菌株均可发酵生产右旋糖酐酶。本发明利用细丽毛壳菌发酵生产右旋糖酐酶在国内还未见有相关报导。 

发明内容

本发明的目的是提供一种利用细丽毛壳菌发酵制备右旋糖酐酶粗酶的方法。 

本发明解决上述技术问题的技术方案如下。 

一种利用细丽毛壳菌发酵制备右旋糖酐酶粗酶的方法，是在培养基中加入细丽毛壳菌进行发酵培养，然后经离心分离得到的上清液即为右旋糖酐酶粗酶，具体操作步骤如下： 

1.在250mL摇瓶中加入15～50mL培养基和细丽毛壳菌种液，细丽毛壳菌种液的量是培养基体积的6％～16％；培养基为马铃薯浸取液、水、葡萄糖， 它们的重量百分比为：马铃薯浸取液∶水∶葡萄糖＝90～98％∶1～5％∶1～5％。 

2.发酵培养：将步骤1)的摇瓶放在摇床中，控制摇床转速为0～200r/min、温度为25～28℃，进行发酵培养0～48h，得到菌种培养液。 

3.离心分离：将菌种培养液在温度为4℃的离心机中离心5～15min，离心机的转速为2000～4700r/min；取其上清液，即为右旋糖酐酶粗酶液。 

本发明的有益效果是：本发明所提供的右旋糖酐酶粗酶的制备方法工艺简单，成本低，所得右旋糖酐酶粗酶对制糖生产过程中产生的右旋糖酐降解效果好。 

具体实施方式

下面结合实施例对发明作进一步描述。 

实施例1 

按重量计算将马铃薯浸取液170克，葡萄糖3.0克，水5克，以此作为培养基分装至6个250mL锥形瓶，装液量为25mL，加入1.5mL细丽毛壳菌种培养液，在摇床转速为200r/min，温度在25～28℃间进行培养48小时，得到菌种培养液；将菌种培养液在温度为4℃的离心机中离心5min，离心机的转速为4700r/min。取其上清液，即右旋糖酐酶粗酶液。 

实施例2 

按重量计算将马铃薯浸取液180克，葡萄糖4.0克，水8克以此作为培养基分装入250mL锥形瓶，装液量为50mL，加入8mL细丽毛壳菌种培养液，在摇床转速为100r/min，温度在25～28℃之间进行培养24小时，得到菌种培养液；将菌种培养液在温度为4℃的离心机中离心15min，离心机的转速为2000r/min。取其上清液，即右旋糖酐酶粗酶液。