[发明专利]结合EPHB4、抑制血管发生和肿瘤生长的抗体

说明书

本申请是发明人于2005年3月11日提交的题为“结合EPHB4、抑制血管发生和肿瘤生长的抗体”的中国专利申请200580015376.9的分案申请。

相关申请

本申请要求于2004年9月23日递交的美国临时申请60/612,908、于2004年9月23日递交的美国申请10/949,720以及2004年3月12日递交的美国申请10/800,350的优先权。相关申请的完整教导全部在此处引用作为参考。

背景技术

EphB4，有时也称为肝配蛋白受体B4或肝细胞瘤跨膜激酶(HTK)，是跨膜受体蛋白-酪氨酸激酶家族中的一员。EphB4含有一个由配体结合结构域(也称为球蛋白结构域)、富半胱氨酸结构域以及一对III型纤连蛋白重复(见如图5)组成的细胞外结构域。胞浆结构域中含具有两个保守酪氨酸残基的近膜区、蛋白质酪氨酸激酶结构域、不育α基序(SAM)以及PDZ结构域结合基序。EphB4与膜结合配体肝配蛋白B2相互作用(Sakano，S.等人，Oncogene.1996 Aug 15；13(4)：813-22；Brambilla R.等人EMBO J.1995 Jul 3；14(13)：3116-26)。EphB4与Eph家族的其他成员一样，通过结合成簇的膜连接肝配蛋白配体而被活化(Davis S等人，Science.1994 Nov4；266(5186)：816-9)，提示Eph受体的活化需要表达受体的细胞与表达配体的细胞间的接触。一旦配体结合，EphB4受体形成二聚体并自磷酸化近膜区的酪氨酸残基从而达到完全活化。一般认为当表达EphB4的细胞遇到表达肝配蛋白B2的细胞时，EphB4-肝配蛋白B2的相互作用和聚合会激发两种细胞内的信号转导。

EphB4-肝配蛋白B2信号转导涉及血管发生(Wang等人.Cell.1998May 29；93(5)：741-53；Gerety等人，Mol Cell.1999Sep；4(3)：403-14)。血管发生是从先前存在的微管结够的内皮中产生新的血管，是宿主体内实体肿瘤生长、进展和转移的关键步骤。在正常的生理性血管发生中，血管内皮与其周围基质成分间的自分泌、旁分泌以及邻分泌相互作用在空间和时间上都受到严格的调节。此外，促血管发生和血管稳定的细胞因子以及生长因子的水平和活性也保持平衡。与之相反，活跃肿瘤生长所必需的病理性血管发生持续不衰，是正常血管发生系统失调节的表现。特别是实体和造血系统类型的肿瘤，更与高水平的异常血管发生相关。

一般认为肿瘤的发生包括一系列有序而相互作用的步骤，最终导致产生具有侵袭性生长潜能的自主性克隆。这些步骤包括持续的生长和无限的自我更新。肿瘤细胞种群的一般特征在于生长信号的自供给、对生长抑制信号敏感性降低以及对凋亡的耐受。起始异常生长的遗传的或细胞发生的事件通过阻断凋亡，将细胞维持在一个延长的“就绪”状态。

本公开内容的目的在于提供可抑制血管发生和肿瘤生长的试剂和治疗手段。

发明概述

本公开内容一方面提供了抑制EphB4介导功能的多肽试剂，包括可以结合EphB4并通过特定途径影响EphB4的抗体及其抗原结合部分。正如此处所述，EphB4和肝配蛋白B2参与了多种疾病状态，包括癌症和与有害或过度血管发生相关的疾病。因此，此处公开的某些多肽试剂也可用于治疗此类疾病。此外，本公开内容涉及在多种肿瘤中EphB4和/或肝配蛋白B2常常高水平表达这一发现。因此，能够下调EphB4或肝配蛋白B2功能的多肽试剂可以通过直接作用于肿瘤细胞而影响肿瘤，也可以通过间接作用于肿瘤募集的血管发生过程而对肿瘤产生影响。在某些实施方案中，本公开内容提供了特别适于用下调EphB4或肝配蛋白B2功能的试剂治疗的肿瘤类型的鉴定。