[发明专利]一种鉴别建鲤不同家系的分子标记方法

权利要求书

1.一种鉴别建鲤不同家系的分子标记方法，其特征在于，采用以下提取步骤：

（1）选用12对特异微卫星引物进行PCR反应，这12对特异微卫星引物名称和序列列表如下：

编号 正向引物DNA序列(5'-3') 反向引物DNA序列(5'-3') 退火温度1 cctgacacctgccgttcttcctctgttctgcctccc60℃2caggaggacgtaagggagagggctgaggagtgatgaa60℃3 cccctctgcccaatgacacggtgagcgagaaacgaa60℃4gaaaggagttcccacaagagctgaggacctagacgt58℃5agatttcgtctaccaaggacttccacctgagacaacac54℃6tcctgcatctgagtgacagccagacattagccgggtagga59℃7gtgacgacagcgttagcattaacaagcgcaggctaatcat62℃8acacacctgcgctcactaaattgtgtttcaggctacaaaagg57℃9aaacacagccagacatgcagtgcttcaaatcaatccacaaa59℃10ctgagctgacctcgtgtctgttttctgcggaaacattgtg59℃11ctgcccaacatcaacaagtgcatgcaaactgcaaggacat59℃12tgcattattgtgtccctccacacagcatgagcagaggaag60℃

（2）从待测不同家系的建鲤个体及亲本采样血液或鳍条，采用DNA提取法提取基因组DNA；

（3）用步骤（2）的基因组DNA为模板，步骤（1）所选的12对微卫星引物分别进行PCR扩增；

（4）对步骤（3）的PCR产物用8.0％的聚丙烯酰胺凝胶进行电泳分离，银染法染色后，拍照记录电泳结果；

（5）将PCR的电泳检测结果进行数字化处理，用遗传分析软件进行分析，获得每个个体之间的遗传距离，并构建进化树，根据个体间的遗传距离聚类结果，区分来自不同家系的个体。