[发明专利]一种制备哥纳香庚内酯A、B的方法

说明书

技术领域

本发明属于植物有效成分提取技术领域，涉及一种制备哥纳香庚内酯A、B的方法。

背景技术

巨大哥纳香Goniothalamus giganteus Hook.f.et Thomas是番荔枝科（Annonaceae）哥纳香属植物，该属植物含有内酯类化合物，有较强的细胞毒性。1993年从巨大哥纳香中分离得到两种内酯类化合物，分别为哥纳香庚内酯A（Goniobeptolide A）和哥纳香庚内酯B（Goniobeptolide B），均对人实体瘤细胞培养系显示边缘细胞毒活性。其ED₅₀（μg/ml）对A-549分别为4.25、24.31，MCF-7分别为72.76、10.93；HT-29分别为13.68、6.91。哥纳香庚内酯A分子式为C₁₄H₁₈O₆，分子量为282.29，为无色油状物；哥纳香庚内酯B分子式为C₁₅H₂₀O₆，分子量为296.32，为无色油状物。其分子结构式如下：

哥纳香庚内酯A    R=CH₃

哥纳香庚内酯B    R=CH₂CH₃

目前，哥纳香庚内酯多采用化学合成得到，该方法存在操作繁琐，步骤多，合成率低、杂质多等缺陷。本发明提供一种从天然植物中提取分离哥纳香庚内酯A和B的方法，工艺简单、纯度高，为该属植物化学研究积累了资料，并为后续深入研究开发提供物质基础。

发明内容

本发明的目的在于提供一种制备哥纳香庚内酯A、B的方法。

本发明提供的从巨大哥纳香中提取制备哥纳香庚内酯的方法步骤如下：

（（1）将巨大哥纳香药材粉碎，用乙醇微波提取2-4次，每次10-120min，合并提取液浓缩得浸膏；

（2）将浸膏用乙酸乙酯和水的混合溶液溶解，过滤，乙酸乙酯和水的体积比为9:1，滤液静置分层10-24h，分液，取上相，减压浓缩蒸干得到乙酸乙酯萃取物；

（3）将乙酸乙酯萃取物用正己烷和甲醇的混合溶液溶解，过滤，正己烷和甲醇的体积比为2:1，滤液静置分层5-10h，分液，取下相，减压浓缩蒸干得到甲醇萃取物；

（4）甲醇萃取物通过硅胶柱层析，以石油醚-乙酸乙酯为洗脱剂进行梯度洗脱，其中石油醚-乙酸乙酯体积比为1:1洗脱部分通过葡聚糖凝胶柱色谱，以二氯甲烷-甲醇体积比为4:1洗脱纯化，得到哥纳香庚内酯B；石油醚-乙酸乙酯体积比为1:4洗脱部分通过葡聚糖凝胶柱色谱，以二氯甲烷-甲醇体积比为4:1洗脱纯化，得到哥纳香庚内酯A。

所述步骤（1）中巨大哥纳香茎皮粉碎过20-100目筛。

所述步骤（4）中石油醚-乙酸乙酯梯度洗脱是按石油醚-乙酸乙酯体积比0:1、4:1、1:1、1:4进行梯度洗脱。

本发明的特点在于：通过乙酸乙酯-水和正己烷-甲醇体系的分配，尽可能萃取得到哥纳香庚内酯；经硅胶柱和葡聚糖凝胶柱层析，可得到高纯度的哥纳香庚内酯。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明作进一步阐述，但本发明不限于此。

实施例1：

将5kg干燥的巨大哥纳香茎叶粉碎过40目筛，用80%乙醇微波提取3次，每次30min，合并提取液浓缩得到浸膏。将浸膏用乙酸乙酯和水的混合溶液（乙酸乙酯和水的体积比为9:1）搅拌溶解，过滤，滤液静置分层20h，分液，取上相，减压浓缩蒸干得到乙酸乙酯萃取物。将乙酸乙酯萃取物用正己烷和甲醇的混合溶液（正己烷和甲醇的体积比为2:1）搅拌溶解，过滤，滤液静置分层8h，分液，取下相，减压浓缩蒸干得到甲醇萃取物。将甲醇萃取物通过硅胶柱层析（甲醇萃取物与硅胶用量之比为1:5），按石油醚-乙酸乙酯体积比0:1、4:1、1:1、4:1进行梯度洗脱，每个梯度用量1000ml，其中石油醚-乙酸乙酯体积比为1:1洗脱部分通过葡聚糖凝胶柱色谱，以二氯甲烷-甲醇体积比为4:1洗脱纯化，减压浓缩干燥得到哥纳香庚内酯B42.9mg；石油醚-乙酸乙酯体积比为1:4洗脱部分通过葡聚糖凝胶柱色谱，以二氯甲烷-甲醇体积比为4:1洗脱纯化，减压浓缩干燥得到哥纳香庚内酯A42.3mg。

实施例2：