[发明专利]一种洋蓟素的纯化方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种洋蓟素的纯化方法，特别是涉及一种采用高速逆流色谱纯化洋蓟素的方法。

背景技术

洋蓟素（Cynarin）又叫朝蓟素，朝鲜蓟酸，无色针状结晶(稀醋酸)，熔点225～227℃，CAS号1884-23-7，分子式C₂₅H₂₄O₁₂，分子量516.54，分子结构

洋蓟素微溶于冷水，较易溶于沸水中，溶于醇类、冰醋酸等，具有增强胆汁降低脂肪，肝脏解毒，预防脂肪肝；能有效抑制LDL胆固醇氧化，降低胆固醇的作用。

朝鲜蓟学名Cynarascolymus L，为菊科(Comopsite)菜蓟属多年生草本植物。未开放时花蕾的总苞和膨大的花托供食用。研究发现朝鲜蓟的茎叶中含有大量的酚酸类物质，其中洋蓟素含量在0.5%左右，而茎叶多为废弃物。

从朝鲜蓟中提取洋蓟素的方法，一般采用的大孔树脂和膜分离法，得到的产品多为粗提物。如专利（申请号200910107323）“一种朝鲜蓟中洋蓟素的提纯方法”，该专利公开的方法是朝鲜蓟叶通过乙醇或丙酮溶液提取，提取液浓缩后水沉过滤，再将滤液进行微滤处理；调节所得透析液pH值，通过大孔吸附树脂层析柱得蓟素粗产品纯度达20%以上。制备高含量洋蓟素的方法，一般硅胶柱层析或制备液相分离。硅胶柱分离样品损失严重，溶剂用量大，周期长，而制备液相分离制备量较小。

发明内容

本发明的目的是克服现有方法的不足和技术缺陷，提供一种洋蓟素的纯化方法。

本发明的目的是通过以下技术方案来实现的：一种洋蓟素的纯化方法，其特征在于以下步骤：

a.取朝鲜蓟茎叶粉碎，加入4-10倍量水，加热至45-65℃，浸泡提取1-2小时，提取2-3次，提取液减压浓缩，浓缩液用乙酸乙酯萃取，萃取液回收试剂，得粗提物；

b.取正己烷、乙酸乙酯、甲醇、水溶液混合充分分层后，取下相做流动相，上相做固定相，采用高速逆流色谱分离上述粗提物，紫外检测器在线监测，收集目标流分，减压浓缩结晶，干燥得高纯度洋蓟素。

所述步骤b中的正己烷、乙酸乙酯、甲醇、水溶液混合比例为：1-3:5-9:2-4:6-11。

所述步骤b中的高速逆流色谱分离主机转速600-1000rpm，流动相流速1-4ml/min。

本发明的优势是：方法采用高逆流色谱方法纯化洋蓟素，是一种液液分配色谱法，无需固体载体，对分离样品无吸附，分离速度快，制备量大，溶剂用量小而可以循环利用。

具体实施方式

下面将结合具体实施方式进一步说明本发明。

实施例1：

朝鲜蓟茎叶粉碎，取2kg，加入10倍量水加热到65℃，浸泡1小时，抽取液体，再加4倍量水，提取1次，合并提取液减压浓缩，浓缩液加入等体积乙酸乙酯萃取2次，萃取液回收试剂，得浸膏。取正己烷、乙酸乙酯、甲醇、水溶液按1:5:2:6比例混合，充分分层后，取上相注入高速逆流色谱柱做固定相，转动主机700rpm，泵入下相做流动相，动态平衡后，流动相流速调整为2ml/min，并用流动相溶解浸膏，由进样阀进样，紫外检测器在线监测，收集目标流分，减压浓缩，结晶，干燥得洋蓟素900mg，含量98.5%。

实施例2：

朝鲜蓟茎叶粉碎，取2kg，加入8倍量水加热到45℃，浸泡2小时，抽取液体，再加5倍量水，提取1次，合并提取液减压浓缩，浓缩液加入等体积乙酸乙酯萃取2次，萃取液回收试剂，得浸膏。取正己烷、乙酸乙酯、甲醇、水溶液按3:9:4:11比例混合，充分分层后，取上相注入高速逆流色谱柱做固定相，转动主机800rpm，泵入下相做流动相，动态平衡后，流动相流速调整为3ml/min，并用流动相溶解浸膏，由进样阀进样，紫外检测器在线监测，收集目标流分，减压浓缩，结晶，干燥得洋蓟素940mg，含量98.1%。